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金银花与山银花主要有效成分含量比较要点

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2022年4月17日发(作者:上海新华儿童医院)

·926·                               国际中医中药杂志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10 

·论著·

金银花与山银花主要有效成分含量比较

饶伟文黄海燕

【摘要】目的通过测定金银花和山银花主要有效成分含量,比较两者的质量。方法按2015年

版《中华人民共和国药典》金银花和山银花项下收载的含量测定方法,对50批不同产地金银花、山银花

中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量进行测定。结果金银花木犀草苷含量较

高,绿原酸含量较低,不含或少含皂苷类成分。山银花的主要基源灰毡毛忍冬、红腺忍冬的绿原酸、总

皂苷含量较高,少含或不含木犀草苷。结论金银花与山银花的主要成分含量各有特,部分金银花样

品中皂苷含量较高,用作注射剂原料时,应做皂苷限量检查。

【关键词】金银花;山银花;有效成分;含量测定;质量控制

ComparativeanalysesofthemainactiveingredientsofLoniceraejaponicaeflosand

LoniceraeflosRaoWeiwen,InstitutesforFoodandDrugControl,Guilin541001,

China

Correspondingauthor:RaoWeiwen,Email:glyjs_raoww@

【Abstract】ObjectiveTocomparethequalityofLoniceraeflosandLoniceraejaponicaeflosby

sAccordingtomethodsandstandardsofdeterminationin

ChinesePharmacopoeia(2015Edition),thecontentofchlorogenicacid,galuteolin,macranthoidinBand

raeflosweredetermined.

ResultsForLoniceraejaponicaeflos(LonicerajaponicaThunb.),thecontentsofgaluteolinwashigher,and

chlorogenicacidwaslower,mainspeciesofLoniceraeflos(Lonicera

macranthoidesHand.-icerahypoglaucaMiq.),thecontentsofchlorogenicacidandthesumof

saponinswerehigher,siThemainactiveingredientsofLoniceraejaponicae

tentsofsaponinsinsomesamplesofLoniceraejaponicaeflos

werehigher,sothetestofsaponinshouldbecideredwhenitsrawmaterialforinjection.

【Keywords】Flosloniceraejaponicae;Floslonicerae;Mainactiveingredients;Determination;Quality

control

金银花是传统常用中药,来源于忍冬科植物

忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或带初

开的花。1977-2000年前后5版《中华人民共和

国药典》(以下简称《中国药典》)收载的金银花,

其来源包括忍冬科植物忍冬Lonicerajaponica

Thunb.、红腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.、山银

花LoniceraconfusaDC.和毛花柱忍冬Lonicera

dasystylaRhed.。2005年版《中国药典》将其分列

DOI:10.3760/.1673-4246.2016.10.017 

作者单位:541002广西壮族自治区桂林食品药品检验所

通信作者:饶伟文,Email:glyjs_raoww@

为金银花和山银花2个品种,金银花的来源为忍

冬,山银花的来源为忍冬科灰毡毛忍冬Lonicera

macranthoidesHand.-Mazz.、红腺忍冬Lonicera

hypoglaucaMiq.、华南忍冬LoniceraconfusaDC.

和黄褐毛忍冬LonicerafulvotomentosaHsuet

。但两者性味归经、功效、主治、用法

用量相似1,临床应用较为混乱。[]

目前,有关金银花与山银花所含主要成分的

含量比较研究已有报道,但对两者化学成分系统

对比分析的数据尚不多2-4。为进一步比较金银花[]

和山银花的质量,本研究按照2015年版《中国药

万方数据

国际中医中药杂志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10                              ·927· 

典》金银花、山银花项下收载的含量测定方法,

对50批不同产地金银花、山银花中绿原酸、木犀

草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量进

行对比,为指导其临床合理应用提供参考。

1仪器与试药

1.1试验仪器

Waters2695/2998/2487液相谱仪(美国

Waters公司);Alltech3300ELSD检测器(美国奥

泰公司);KQ-600E型超声仪(昆山市超声仪器有

限公司);SIGMA3-30K高速台式冷冻离心机

(SIGMA-ALDRICH);LabTechEV311旋转蒸发

仪(北京莱伯泰科仪器股份有限公司)。

1.2试验试剂

灰毡毛忍冬皂苷乙对照品(批号111814-

201303,含量92.8%)、川续断皂苷乙对照品(批号

111813-201202,含量93.4%)木犀草苷对照品(批

号111720-201307,含量99.3%)、绿原酸对照品(批

号110753-201314,含量96.6%)均购于中国食品药

品检定研究院;乙腈、甲酸、冰醋酸为谱纯,

其余试剂均为分析纯,水为高纯水。

1.3样品

金银花19批、山银花31批(包括灰毡毛忍冬

12批、红腺忍冬15批、黄褐毛忍冬3批和华南忍

冬1批),均系本所采集或收集,并由饶伟文主任

药师鉴定金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera

japonicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花;山银花

为同属植物灰毡毛忍冬Loniceramacranthoides

Hand.-Mazz.、红腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.、

黄褐毛忍冬LonicerafulvotomentosaHsuet

和华南忍冬LoniceraconfusaDC.的干

燥花蕾或带初开的花。

2方法与结果

2.1木犀草苷的含量测定

2.1.1谱条件:按2015年版《中国药典》金银

万方数据

花项下木犀草苷含量测定方法[1]进行。谱柱为

AgilentZORBAXSB-pheny(4.6mm×250mm,

5μm);流动相为乙腈(A)-0.5%冰乙酸(B),梯度

洗脱,洗脱程序见表1;流速为1.0ml/min;检测

波长为350nm。理论塔板数按木犀草苷峰计算不

低于20000,与其他谱峰分离度大于1.5。谱

图见图1。

表1流动相梯度洗脱表(%)

时间乙腈0.1%乙酸

0~15min10~2090~80

15~30min2080

30~40min20~3080~70

A

1

010203040

B

1

010203040

t/min

注A:木犀草苷对照品溶液;B:供试品溶液;1:木犀草苷

图1木犀草苷的HPLC图

2.1.2溶液配制:①对照品溶液的配制:精密称

取木犀草苷对照品10.21mg,置于50ml容量瓶

中,用70%乙醇溶解并稀释至刻度,得对照品母

液(202.77μg/ml),再取2ml至10ml容量瓶中,

用70%乙醇溶解并稀释至刻度,制成40.55μg/ml

的对照品溶液。②供试品溶液的配制:取金银花

或山银花细粉(过4号筛)约2.00g,精密称定,置

具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,称定重

量,超声处理(功率250W,频率35kHz)1h,放

冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,

摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,回收溶剂至

干,残渣用70%乙醇溶解并转移至5ml量瓶中,

加70%乙醇至刻度,即得。

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2.1.3线性关系考察:分别吸取1、2、3、5、10ml

的202.77μg/ml木犀草苷对照品溶液置于10ml

容量瓶中,以70%乙醇定容至刻度,得到浓度分

别为20.28、40.55、60.83、101.39、202.77μg/ml

的木犀草苷对照品溶液。精密吸取对照品溶液10μl,

分别注入液相谱仪中,按上述谱条件测定峰

面积。以测得峰面积为纵坐标(A),对照品进样量

为横坐标(C)绘制标准曲线,得木犀草苷回归方

程:A=1.8874C+105.77,R=0.9995,表明木犀

草苷进样浓度在20.28~202.77μg/ml范围内与峰

面积呈良好线性关系。

2.1.4精密度考察:取木犀草苷对照品溶液

(40.55μg/ml)连续进样5次,结果木犀草苷峰面积

的RSD=0.24%(n=5),表明仪器精密度良好。

2.1.5稳定性试验:取供试品溶液1份,分别于0、

2、6、12、24h测定,

记录峰面积,计算RSD=0.33%

(n=5),表明供试品溶液在24h内稳定性良好。

2.1.6重复性试验:取同一批金银花样品粉末6份,

按上述方法测定,计算木犀草苷平均含量为0.052%,

RSD=1.28%(n=6),表明本方法重复性良好。

2.1.7加样回收率试验:在已测定木犀草苷含量

的金银花样品中定量加入木犀草苷对照品,测定

9次,平均回收率为103.10%,RSD=2.27%。

2.1.8样品测定结果:精密吸取对照品溶液

(40.55μg/ml)、供试品溶液各10μl,注入液相

谱仪,以外标法计算样品中木犀草苷含量。结果

见表2、表3。

2.2绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙

的含量测定

2.2.1谱条件:按2015年版《中国药典》山银

花项下灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量测

定方法[1]进行。谱柱为PhenomenexGemini

C18(4.6mm×250mm,5μm);柱温30℃;ELSD

检测器漂移管温度:60℃,气体流量2.0ml/min。

理论塔板数按绿原酸峰计算不低于20000,绿原

酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙与其他

万方数据

谱峰分离度均大于1.5。谱图见图2。

A

1

2

3

0102030

B

2

1

3

0102030

t/min

注A:混合对照品溶液;B:供试品溶液;1:绿原酸;2:灰毡毛忍

冬皂苷乙;3:川续断皂苷乙

图2绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的HPLC图

2.2.2溶液制备:①对照品溶液的配制:精密称

取绿原酸对照品21.12mg、灰毡毛忍冬皂苷乙对

照品21.72mg和川续断皂苷乙对照品20.63mg置

于20ml的量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇

匀,作为储备液。再用甲醇逐步稀释至以下所需

要的浓度:绿原酸50.00、102.01、204.02、408.04、

816.08μg/ml;灰毡毛忍冬皂苷乙50.39、100.78、

201.56、503.90、1007.81μg/ml;川续断皂苷乙

9.63、19.27、96.34、192.68、385.37μg/ml的溶液,

即得。②供试品溶液的配制:取金银花或山银花

粉末(过四号筛),取约0.30g,精密称定,置50ml

离心管中,加50%甲醇40ml并混匀,超声处理

40min(功率250W,频率35kHz),5000r/min离

心10min,取上清液转移至50ml量瓶中,离心管

中残渣再加50%甲醇7ml涡旋1min,5000r/min

离心10min,合并上清液至同一量瓶中,加50%

甲醇至刻度,混匀,即得。

2.2.3线性关系考察:称取绿原酸对照品22.06mg,

置20ml容量瓶,用甲醇溶解并稀释至刻度,并稀

释至浓度分别为0.53、

1.07、5.33、10.65、53.27、

106.55、1065.50μg/ml的溶液;精密称取灰毡毛

忍冬皂苷乙对照品21.54mg,置10ml容量瓶,甲

醇溶解并稀释至刻度,并稀释至浓度分别为5.00、

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9.99、49.97、99.95、499.73、999.46、1998.91μg/ml

的溶液;精密称取川续断皂苷乙21.20mg,置20ml

容量瓶中,甲醇溶解并稀释至刻度,并稀释至浓

度分别为4.95、9.90、49.50、99.00、198.01、495.02、

990.04μg/ml的溶液。精密吸取上述各对照品溶液

10μl,按上述谱条件测定峰面积。以峰面积为

纵坐标(A),对照品进样量为横坐标(C)绘制标准曲

线,得绿原酸logA=1.2976×logC+2.6197,R=

0.9995,灰毡毛忍冬皂苷乙logA=1.2753×logC+

2.8162,R=0.9995,川续断皂苷乙logA=1.2818×

logC+2.8366,R=0.9997;表明绿原酸进样浓度

在0.53~1065.50μg/ml范围、灰毡毛忍冬皂苷乙

在5.00~1998.91μ

g/ml范围、川续断皂苷乙在

4.95~990.04μg/ml范围内呈良好线性关系。

2.2.4精密度考察:取浓度约为200μg/ml的对照品

溶液,连续进样5次,计算绿原酸峰面积的RSD=

0.35%(n=5),灰毡毛忍冬皂苷乙峰面积的RSD=

0.90%(n=5),川续断皂苷乙峰面积的RSD=

1.28%(n=5),表明仪器精密度良好。

2.2.5稳定性试验:取供试品溶液1份,分别于0、

2、6、12、24h测定,记录峰面积,结果绿原酸

峰面积的RSD=0.52%(n=5),灰毡毛忍冬皂苷乙

峰面积的RSD=0.61%(n=5),川续断皂苷乙峰面

积的RSD=0.99%(n=5),表明供试品溶液在24h

内稳定性良好。

2.2.6重复性试验:称取同一批样品粉末6份,按上

述方法测定,计算绿原酸平均含量为5.42%,

RSD=

0.62%(n=6),灰毡毛忍冬皂苷乙平均含量7.65%,

RSD=0.93%(n=6),川续断皂苷乙平均含量为

0.86%,RSD=0.97%(n=6),表明重复性良好。

2.2.7加样回收率试验:在已测定含量的山银花

样品中加入定量对照品,测定5次,绿原酸平均

回收率为93.65%,RSD=0.72%;灰毡毛忍冬皂苷

乙平均回收率为100.78%,RSD=2.63%;川续断

皂苷乙平均回收率为102.24%,RSD=1.34%。

2.2.8样品测定结果:精密吸取“2.2.2”项下配

制的5种浓度对照品溶液、供试品溶液各10μl,

注入液相谱仪,以外标曲线法对数方程计算样

品中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙

的含量。见表2、表3。

表219批金银花含量测定结果(%)

基源来源/产地灰毡毛忍冬皂苷乙川续断皂苷乙皂苷总量木犀草苷绿原酸

忍冬桂林普兰德生物科技有限公司/恭城县栽培00.240.240.0713.08

云南鸿翔中药科技有限公司/山东0000.0593.52

玉林中药材市场/山东00.090.090.0633.52

玉林中药材市场/山东0.430.080.510.0572.85

河北安国药材市场/河北0000.0423.03

康美药业股份有限公司/河南0000.0533.61

玉林祥生中药饮片公司/不详2.020.192.210.0443.54

自采/广西桂林市郊区01.301.300.0100.06

河北安国药材市场/河南0000.0672.92

自采/广西桂林市郊区00.920.920.0312.63

湖南馨恒堂中药科技有限公司/山东0000.0332.91

亳州市京皖中药饮片厂/河南0000.0493.14

安徽神州中药饮片有限公司/河南0000.0582.58

成都康美药业有限公司/河南0000.0463.25

成都康美药业有限公司/河南0000.0353.16

康美药业股份有限公司/河南0000.0423.10

自采/北京市顺义区0000.0291.08

玉林中药材市场/山东0000.0522.72

玉林中药材市场/山东1.090.271.200.0191.17

万方数据

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表331批山银花含量测定结果(%)

基源

红腺忍冬

华南忍冬

来源/产地灰毡毛忍冬皂苷乙川续断皂苷乙皂苷总量木犀草苷绿原酸

灰毡毛忍冬自采/广西南丹县芒场镇8.290.568.850.0051.86

湖南高桥药材市场/湖南6.040.436.470.0105.18

四川成都荷花池药材市场8.941.1110.050.0104.47

湖南邵阳市隆回县7.310.878.180.0136.44

贵州遵义洪关6.600.597.190.0224.97

浙江永嘉县桥下镇7.140.607.740.0145.73

南宁市乾瑞生态农业合作社/广西南丹7.070.557.620.0165.30

重庆武隆县巷口镇6.850.467.310.0134.32

广西资源县梅溪乡6.630.897.520.0075.10

玉林中药材市场/湖南6.190.676.860.0154.14

玉林中药材市场/广西5.210.605.810.0174.02

安徽井泉集团中药饮片有限公司/广西4.750.405.1503.02

广西忻城县北更乡2.623.516.130.0074.86

广西忻城县1.872.194.060.0044.91

广西马山县古寨乡2.953.076.020.0026.43

广西马山县2.222.654.870.0014.98

浙江永嘉县桥下镇04.504.500.0012.10

浙江乐清东亚石斛有限公司03.533.530.0091.71

浙江乐清县雁荡山03.823.820.0152.74

河北安国中药材市场04.454.450.0012.17

安徽亳州中药材市场2.873.806.670.0023.84

广西都安县1.952.704.6502.85

广西都安县3.155.578.7202.81

广西忻城县2.183.385.5605.15

广西忻城县北更乡5.990.346.330.0015.15

广西忻城县6.400.366.760.0015.75

广西忻城县北更乡3.250.824.070.0023.34

玉林中药材市场/贵州0.098.528.610.0130.75

4.794.920.0130.60玉林中药材市场/贵州0.13

黄褐毛忍冬广西百市隆林县桠杈镇0.102.983.080.0160.92

广西药用植物园0.3000.300.0041.19

3讨论

3.1木犀草苷含量情况

19批金银花样品均含木犀草苷,平均含量为

0.045%,其中仅有8批符合《中国药典》规定的

不得少于0.050%;山银花4个基源共31批样品中,

有27批含木犀草苷,但含量均低于0.050%。木犀

草苷平均含量高低顺序为金银花>黄褐毛忍冬>

灰毡毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬。

3.2总皂苷含量情况

19批金银花中,仅7批含川续断皂苷乙,其

中3批含灰毡毛忍冬皂苷乙,总皂苷含量较低,

在0.09%~2.21%范围;12批灰毡毛忍冬均含2种

皂苷成分,总皂苷平均含量为7.40%;15批红腺

忍冬均含皂苷成分,但有4批不含灰毡毛忍冬皂

苷乙,总皂苷含量平均为5.34%;3批黄褐毛忍冬

中总皂苷含量平均为5.54%;华南忍冬含总皂苷

0.30%。总皂苷平均含量高低顺序为:灰毡毛忍冬>

黄褐毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬>金银花。

3.3绿原酸含量情况

19批金银花中绿原酸含量平均为2.72%,有

15批符合《中国药典》规定(不得少于1.50%);

12批灰毡毛忍冬中绿原酸含量平均为4.55%,其

万方数据

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中11批符合《中国药典》规定(不得少于2.00%);

15批红腺忍冬中绿原酸含量平均为3.92%,其中

14批符合《中国药典》规定;3批黄褐毛忍冬中绿

原酸含量平均为0.76%,1批华南忍冬绿原酸含量

为1.19%,均不符合《中国药典》规定。绿原酸平

均含量由高到低依次为:灰毡毛忍冬>红腺忍冬>

金银花>华南忍冬>黄褐毛忍冬。

总体上看,金银花木犀草苷含量较高,绿原

酸含量较低,不含或少含皂苷类成分;相比之下,

灰毡毛忍冬和红腺忍冬含绿原酸和总皂苷较高,

少含或不含木犀草苷。从测定50批样品的结果看,

不同样品中主要成分的有无及含量高低不仅与植

物品种、基源有关,也与产地、加工方法有关。

因此,根据木犀草苷或皂苷成分的有无判定是金

银花或山银花是不可靠的。

3.4关于金银花与山银花质量的综合评价问题

金银花与山银花均为忍冬属植物的花,主要

含有机酸类(绿原酸、咖啡酸等)、黄酮类(木犀草

苷等)、皂苷类(灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷

乙等)、挥发油类成分。木犀草苷具有较强的杀菌

消炎,解热镇痛的功效[5];绿原酸具有抗氧化、抗

肿瘤、抗菌、抗病毒、免疫调节、降糖等多种作

用[6];川续断皂苷乙对革兰阳性金黄葡萄球菌、

表皮葡萄球菌和革兰阴性绿脓杆菌、大肠杆菌、

阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌均具有抗菌活性[7];灰

毡毛忍冬皂苷乙有保肝、抗肿瘤及免疫调节作用

等;挥发油有抗菌、抗炎、解热、止咳等作用。

这些成分的药理作用大体上与金银花、山银花的

清热解毒、疏散风热功能相关。因此,目前主要

以这些成分的含量作为质量评价指标。由于中药

普遍存在多组分共存、多种药理作用综合起效的

情况,仅依据其中某一种成分的含量高低判定其

质量优劣显然不科学。因此,我们既不能因金银

花中木犀草苷含量比山银花高就认为其质量更

好,也不能因山银花绿原酸和皂苷含量高就认为

其质量更优。而是应根据各成分的药理作用特点

万方数据

和临床用药目的进行综合评价。据报道,灰毡毛

忍冬和忍冬的有效成分含量存在较大差异,但均

有明显地抑菌杀菌作用,且在抗菌、抗炎、解热、

免疫调节等方面,灰毡毛忍冬与忍冬作用相当[8]。

3.5关于山银花品种问题的建议

2015年版《中国药典》收载的山银花包括灰

毡毛忍冬、红腺忍冬、黄褐毛忍冬、华南忍冬4个

基源。经调查研究发现,目前山银花的主要基源

是灰毡毛忍冬,红腺忍冬次之;黄褐毛忍冬仅在

贵州和广西隆林县有产,华南忍冬已无商品供应,

野外采集标本都不易找到。含量测定结果表明这

2个基源的几种成分含量都偏低,不符合药典规

定。建议今后不再收载黄褐毛忍冬和华南忍冬。

3.6关于金银花与山银花区别使用的建议

根据现有的研究结果,金银花与山银花的成

分各有特。鉴于山银花总皂苷含量较高,金银

花只有少数批次含皂苷。建议中成药注射剂应使

用金银花,且在投料前应先做皂苷限量检查,以

免产生安全风险。对于汤剂配方、口服或外用的

中成药,金银花与山银花均可通用。

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(收稿日期:2016-02-26)

(本文编辑:张琪)

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