万方数据

扬州大学烹饪学报２００６（３）：２３－－２５

Ｃｕｌｉｎａｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

荷叶黄酮和生物碱的提纯及调节血脂作用比较

黄阿根‘，施洪飞２，韦红‘，董瑞建‘，周文娟‘

（１．扬州大学食品科学与工程学院，江苏扬州２２５００１；　２．扬州大学体育学院，江苏扬州２２５００１）

摘要：荷叶有较好的调节血脂功效，其主要活性组分是生物碱和黄酮类化合物，但它们各自在调节血脂中

作用并不清楚，通过对荷叶黄酮和生物碱提取、分离和纯化，并用两分离组分进行大鼠动物实验，比较它们的

调节血脂功效。结果表明：荷叶浸膏、荷叶生物碱时调节血脂中甘油三醋（ＴＧ）的指标有极显著作用，荷叶黄

酮对调节血脂中甘油三醋的有显著作用，同样剂量生药提炼的生物碱明显优于荷叶黄酮的降血脂功效。

关键词：荷叶；黄酮；生物碱；调节血脂

中图分类号：Ｒ　１５１．３文献标识码：Ａ文章编号：１００９一４７１７（２００６）０３一００２３一０３

荷叶是既可药用又可食用的资源，具有良好的调节血脂功效，为许多研究报道所证实

，但其功效因

子不明确，一般认为其主要有效成分是生物碱和黄酮类化合物〔１－４１。而将单味荷叶黄酮

、生物碱进行

分离纯化，比较它们的调节血脂功效，未见报道。本文通过对荷叶黄酮、生物碱进行提取分离纯化得到

较纯的黄酮、生物碱，并对它们进行大鼠功能实验，以比较荷叶黄酮、生物碱在调节血脂方面发挥的功能

作用，为有效开发利用荷叶提供理论依据。

１实验材料和方法

１．１实验材料

１．１．１供试品由本实验室制备；荷叶浸膏（（１　ｍｇ相当于生药１０．１１　ｍｇ）　；荷叶黄酮（１　ｍｇ相当于生药

８０．　００　ｍｇ）；荷叶生物碱（１　ｍｇ相当于生药７９０　ｍｇ）．

１．１．２动物ＳＤ雄性大鼠，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司仁ＳＣＸＫ（沪２００３　－０００３）］ａ

１．１．３药品及试剂血脂康胶囊，北京北大维信生物科技有限公司出品（批号Ｚ１０９５００２９）。甘油三醋

试剂盒（批号２２１０１１）、胆固醇试剂盒（批号０５００３１），购自中生北控生物科技股份有限公司。高密度脂

蛋白胆固醇试剂盒（批号ＴＨ５１００９　）、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒（批号０５１１０４Ｔ），购自上海紫兴药业

有限公司。

１．１．４高脂饲料由江苏省协同医药生物工程有限责任公司配制提供（配方：８０．５％基础饲料，１０％猪

油，４％白糖，５％鸡蛋黄，０．５％胆盐）。

１．１．５主要仪器７１５０自动生化（日本日立公司）；高效液相谱仪（美国Ｔｈｅｒｍｏ公司，ＰＤＡ

检测器，７４０谱数据处理机。ＯＤＳ　Ｃ１８谱柱）；ＨＬ一２Ｓ恒流泵（上海青浦沪西仪器厂）；ＳＢＳ一１００数

控计滴自动部分收集器（上海青浦沪西仪器厂）；ＴＨ一５００Ａ梯度混合器（上海沪西器厂有限公

司）；ＲＥ一５２Ａ旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。

１．２分析与实验方法

１．２．１荷叶浸膏和黄酮类化合物的提取

荷叶粉末

６０％乙醇浸提

真空浓缩

一－￣－Ｊ卜浸提液一￣．－－一卜浸膏

碱水洗涤脱脂

过滤

滤液一大孔树脂柱层析７０％ＬＲＩＭ９

收稿日期：２００６一０４一０２

基金项目：江苏省自然科学基金（ＢＫ２００３０４４）０

作者简介：黄阿根（１９６３一，男，江苏泰州人，扬州大学食品科学与工程学院副教授，硕士，从事食品科学与工程研究；

施洪飞（１９６２一，男，江苏扬州人，扬州大学体育学院副教授，博士，从事营养食疗学研究

万方数据

２００６年第３期

扬州大学烹饪学报

第２３卷总第８３期

洗脱液

浓缩

￣－一－－－－」卜真空烘干

荷叶黄酮

１．２．２荷叶生物碱的提取

荷叶粉末

氨水润湿１０

一－－一－一－知－￣￣一

调节ｐＨ＝７．

一一．一－知

０

－．一一补氯仿浸提２次

浸提ｐＨ　＝２ｋＡ＊　　ｒｘ２曳酸水相

过滤

滤液

调节ｐＨ＝　

过滤

滤液

氯仿萃取２次

神－￣一一－－－－－－－月卜氯仿层

真空浓缩

－一一－－－－－一一卜

真空烘干

荷叶生物碱

１．２．３黄酮和生物碱分析方法荷叶中总黄酮采用芦丁为标样ＡＩ（ＮＯ３）３络合分光光度法［５１；荷叶中

芦丁含量采用ＨＰＬＣ分析法［［５１；荷叶生物碱采用嗅钾酚绿比法［６１０

１．２．４血脂的测定方法胆固醇测定采用酶比法；甘油三醋测定采用酶比法；低密度脂蛋白测定

采用选择性抑制法；高密度脂蛋白（ＨＤＬ一Ｃ）测定采用修饰酶法。

１．２．５动物实验方法取３月龄雄性ＳＤ大鼠９０只，随机分成９组，各组均以高脂饲料，自由取食饮

水。各试验组按试验剂量灌胃给药，模型组以相同体积生理盐水灌胃，减肥降脂胶囊剂量按同等单位质

量人用药量计算，荷叶黄酮生物碱用量参照经验给量［［２，７１，中剂量组分别与荷叶浸膏生药用量相当。饲

养２０天后，按实验要求分别灌胃４０天后，禁食２４ｈ，乙醚麻醉、从腹主静脉取血、制备血清，分别测血清

胆固醇（ＣＨＯ）、甘油三酷（ＴＧ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ一Ｃｈ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ　－　Ｃｈ）含量。

采用ＳＰＳＳ统计软件处理数据，　　　　所得数据进行方差齐性检验后，组间比较用均数ｔ检验。

２实验结果与讨论

２．１荷叶黄酮质量检测

ｍＶ

别Ｓ

通过１．　　　　２．３的操作步骤提取分离纯化得到荷

叶黄酮样品，化学吸光法分析得荷叶总黄酮的含们仃」

量为８９．０６％；将制备的黄酮样品用酸水溶解，后

用氯仿萃取，以嗅甲酚绿吸光法检测不出生物碱。０．００　　　　２．６２　　　　５．２５，８８　　　　１０．５０　　　　１３．１２　　　１５．７５　　　　１８．３８　　　２１．００　（Ｍｉｎｕｔｅ）

说明样品提取纯化后已有效去除生物碱。

２．２荷叶生物碱质量检测图１生物碱样品的ＨＰＬＣ图谱

　　　　通过１．２．４的操作步骤，１　ｋｇ荷叶得生物碱１．　２７ｇ，通过计算生物碱样品中总黄酮含量为

１９　．　７３ｍｇ－　ｋｇ－１（１９　．　７３ｐｐｍ），残留芦丁ＨＰＬＣ分析如图１所示，含量为２．１６５ｐｐｍ。说明生物碱中已有

效分离去除了黄酮类化合物。

２．３调节血脂功能实验

　　　　按１．２．５操作方法建立高脂动物模型，分别对模型组、减肥降脂胶囊阳性对照组、荷叶浸膏、荷叶黄

酮、荷叶生物碱进行动物实验，实验过程中生物碱、黄酮都是水难溶解，实验过程中先用乙醇少量多次溶

解，再配以低含量的乙醇溶解（６％－８％），溶解后在热状态下，再蒸出大部分乙醇，配制的灌喂试液在存

放过程中会出现混浊，则需要在每次灌喂前微微加热，用超声波清洗器溶解，提高动物肠胃吸收效果降

低乙醇及样品不溶性对实验的干扰。实验过程中大鼠活动正常，无腹泻、死亡等不正常现象。

灌药前后大鼠的血脂水平见表１，　　　　从表中可见在所选剂量范围内，荷叶黄酮和生物碱使大鼠的胆固

醇（ＣＨＯ）含量有所降低，但无统计学意义；荷叶浸膏、高剂量组荷叶黄酮、高低剂量组荷叶生物碱可使

高脂血症大鼠ＴＣ；显著降低（Ｐ＜０．０５），荷叶生物碱中剂量组可使ＴＧ极显著性降低（Ｐ＜０．０１）；各实验

组对ＨＤＬ一Ｃ，　ＬＤＬ一Ｃ水平无显著性影响。从剂量水平上看，荷叶黄酮与荷叶生物碱的低、中、高剂量

所对应的生药剂量相当，而浸膏用量相当于黄酮、生物碱中剂量对应的生药，比较得出荷叶浸膏、生物碱

有显著降低血脂ＴＣ；作用，而荷叶黄酮对应的相同剂量生药不如生物碱显著。

从黄酮实验剂量情况看，　　　　荷叶黄酮的实验剂量中中低剂量各项指标都未显示出显著性，高剂量指标

有显著性影响，故进一步实验时，应适当调整黄酮剂量范围，进一步考察黄酮对ＴＧ的影响。

一　　２４一

万方数据

２００６　Ｎｏ．３Ｃｕｌｉｎａｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＶｏｌ．　２３　Ｓｔｕｎ　Ｎｏ．　８３

表１高脂大鼠血脂变化情况（ｘ１：，ｎ＝１０）

组别

　　　　剂量ＣＨＯ

ＴＧ　　　　　　

Ｉ丑）Ｌ一Ｃ　　ＬＤＬ一Ｃ

（ｍｇ．　ｋｇ一１）

（ｍｍｏｌ．　Ｌ一１）

（ｍｍｏｌ．　Ｌ一１）

（ｍｍｏｌ．Ｌ一１）

（ｍｍｏｌ．　Ｌ一１）

　　　　模型组

１．６９士０．１９

１．２２士０．２１

１．１３士０．１６

０．６８士０．０７

减肥降脂胶囊１２３１．５６士０．２１

０．７４士０．１０＊

０．９８士０．１２０．６８士０．１５

荷叶浸膏　　６６６１．６５士０．２８

０．６５１０．１８二二

１．１１士０．１０

０．７０士０．１８

荷叶黄酮　　３０１．６９士０．３０

１．１９士０．２７　　

１．０３１０．２１

０．７５士０．１５

６０１．６３士０．２７

１．０８土０．２６　　

０．９９士０．２００．５９士０．１９

１２０

１．５５士０．２２０．９７士０．１６　　　＊１．０３士０．１４

０．５９士０．０９

荷叶生物碱

３．２

１．６７士０．２１

０．８９土０．１５二　　

０．９９士０．２３０．７１士０．１９

６．４１．６２士０．弓

乙

内ｊ０．６９士０．１９１．１４士０．０６

０．６５士０．２０

１２．８１．５３士０．八ｊ４０．７７士０．２１　＊　＊１．２１士０．１８０．６８士０．１３

与模型组比较：＊　Ｐ＜０．０５，二＊Ｐ＜０．０１．

ＣＨ（　　　　）指标实验组都未显示出显著性差别，而由许多研究实验报道，荷叶浸提液有显著降低动物胆

固醇作用［３］，这可能与本次实验胆固醇建模不够理想有关，可能厂家配制的饲料中胆固醇含量不充足。

３结论

　　　　荷叶生物碱对调节血脂中甘油三醋　（ＴＧ）的指标有显著作用，而对应于相同剂量生药的荷叶黄酮不

如荷叶生物碱作用显著，两者对血脂其它指标的影响有待进一步研究。

参考文献：

［１［唐春红，幸宏伟，石轶松．黄酮提取液对大鼠高脂血症及血液流变学参数的影响［Ｊｌ．第三军医大学学报，２００４，２６（７）：

６１６一６１７．　　　　

［２〕涂长春，李晓宇，杨军平．荷叶生物总碱对肥胖高脂血症大鼠减肥作用的实验研究［Ｊｌ．江西中医学院学报，２００１，１３

（３）：１２０一１２１．　　　　

［３」关章顺，吴俊．荷叶水提物对高脂血症的降脂效果研究【Ｊ７．郴州医学高等专科学校学报，２００３，５（３）：３一６．

［４］杜力军，孙虹．荷叶大豆及其合剂调脂活性部位的研究［Ｊ］．中草药，２０００，３１（７）：５２６一５２８．

［５］周兰香，黄阿根，钱建亚．分光光度与ＨＰＬＣ法测定荷叶总黄酮的研究〔Ｊｌ．中草药，２００２，３３（１）：３５一３７．

［６］蒋益虹．荷叶生物碱的提取工艺优化．浙江大学学报［Ｊ］．２００４，３０（５）：５１９一５２３．

［７」吴吉茂，史玉梅，刘秋如．荷叶对家兔食饵性高胆固醇血症和动脉样硬化影响［Ｊｌ．江西医学院学报，１９８７，２７（３）：５一８．

Ａ　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｂｌｏｏｄ　Ｌｉｐｉｄ　Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ

Ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　Ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｌｏｔｕｓ　Ｌｅａｆ

ＨＵＡＮＧ　Ａｇｅｎｊ，ＳＨＩ　Ｈｏｎｇ－ｆｅｉ２，ＷＥＩ　Ｈｏｎｇｔ，ＤＯＮＧ　Ｒｕｉ一ｉａｎｌ，ＺＨＯＵ　Ｗｅｎ一ｕａｎｌ

（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００１，Ｊｉａｎｇｓｕ，　Ｃｈｉｎａ；

２．　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００９，　Ｊｉａｎｇｓｕ，　Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｌｏｔｕｓ　ｌｅａｆ　ｉｓ　ｇｏｏｄ　ａｔ　ｂｌｏｏｄ　ｌｉｐｉｄ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅｅｘｉｓｔｅｎｃｅ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ．

Ｈｏｗｅｖｅｒ，　ｔｈｅ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｗｏ

ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓ　ｉｓ

ｕｎｃｌｅａｒ．Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ，　ｓｅｐａｒａｔｅｄ

ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｆｒｏｍ

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ｎｇ

ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ　（ＴＧ），ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ａｎｄ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ

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ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｌｏｗｅｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｌｉｐｉｄ　ｉｎ　ｂｌｏｏｄ．

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　ｌｏｔｕｓ　ｌｅａｆ，　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，　ａｌｋａｌｏｉｄｓ，　ｂｌｏｏｄ　ｌｉｐｉｄ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ（责任编辑：潘英）

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