时珍国医国药２０１３年第２４卷第２期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２０１３　ＶＯＬ．２４　ＮＯ．２　

脾阳虚大鼠下丘脑星形胶质细胞ＧＦＡＰ和小胶质细胞　

０Ｘ４２的表达及大建中汤的干预作用　

王　慧，武静，陈继婷　

５５０００２）　（贵阳中医学院基础医学院，贵州贵阳

摘要：目的观察脾阳虚症大鼠下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞表达的改变，以及大建中汤对脾阳虚大鼠下丘脑星形　

胶质细胞和小胶质细胞表达的影响，探讨下丘脑神经胶质细胞在脾阳虚症发病机制中的作用和大建中汤可能的作用环　

节。方法采用饮食失节伤脾气，劳倦过度伤脾气及苦寒泻下伤脾阳的方法，建立脾阳虚模型。实验分为正常对照组，模　

型组，大建中汤治疗组。采用免疫组织化学染法对下丘脑胶质原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和特异性标记小胶质细胞的　

０Ｘ４２抗体进行染，观察与内脏活动密切相关的下丘脑组织中星形胶质细胞ＧＦＡＰ和小胶质细胞０Ｘ４２表达的变化。　

结果与正常对照组相比，脾阳虚模型组大鼠下丘脑ＧＦＡＰ与０Ｘ４２表达增强，阳性细胞数增多，差异具有统计学意义（Ｐ　

＜０．０１）；大建中汤高剂量组ＧＦＡＰ与０Ｘ４２表达与模型组相比明显下降，具有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论脾阳虚能激　

活下丘脑星形胶质细胞和小胶质细胞，胶质细胞的激活可能是脾阳虚症大鼠模型形成的神经机制之一，大建中汤可能通　

过作用于神经胶质细胞来达到其干预脾阳虚症的作用。　

关键词：大建中汤；脾阳虚；下丘脑；胶质细胞　

Ｄ０Ｉ标识：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１３．０２．０２２　

中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２０１３）０２－０３０４－０２　

Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ＧＦＡＰ　ａｎｄ　ｏＸ４２　ｉｎ　ｈｙｐｏ－　

ｔｈａｌａｍｕｓ　ｉｎ　Ｓｐｌｅｅｎ　Ｙａｎｇ　Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｒａｔｓ　

ＷＡＮＧ　Ｈｕｉ，ＷＵ　Ｊｉｎｇ，ＣＨＥＮＧ　Ｊｉ—ｔｉｎｇ　

（Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｇｕｉｙａｎｇ　５５０００２，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ＧＦＡＰ　ａｎｄ　０Ｘ４２　ｉｎ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ　ｉｎ　Ｓｐｌｅｅｎ　Ｙａｎｇ　Ｄｅｉｆｃｉｅｎｃｙ　ｒａｔｓ，　

ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ　ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｍｉｃｒｏｇｌｉａ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｓｐｌｅｅｎ　Ｙａｎｇ　Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ａｆｔｅｒ　ａｄ—　

ｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇｔａｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓｐｌｅｅｎ　Ｙａｎｇ　Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．　Ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｃｏｎ—　

ｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｉａｌ　ｉｆｂｒｉｌｌａｒｙ　ａｃｉｄｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ　

（ＧＦＡＰ）ａｎｄ　０Ｘ４２　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　

ｇｒｏｕｐ　ｓｈｏｗｅｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｌｅｖｅｌｓ（Ｐ＜０．０１）ｏｆ　ＧＦＡＰ　ａｎｄ　０Ｘ４２　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｎｉｍａｌｓ　ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ　ａ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　

Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｌｅｖｅｌｓ（Ｐ＜０．０１）ｏｆ　ＧＦＡＰ　ａｎｄ　０Ｘ４２　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ｔｈａｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｉｍａｌｓ．　

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｐｌｅｅｎ　Ｙａｎｇ　Ｄｅｉｆｃｉｅｎｃｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　ａｃｔｉｖａｔｅｓ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ　ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｍｉｃｒｏｇｌｉａ；ａ　Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ　ｈａｓ　

ａ　ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｂｙ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ　ＧＦＡＰ　ａｎｄ　０Ｘ４２　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ；　ＳｐｌｅｅｎＹａｎｇ　Ｄｅｉｆｃｉｅｎｃｙ；Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ；　Ｇｌｉａ　ｃｅｌｌ　

脾阳虚是指脾阳虚衰、失于温运、阴寒内生所表现的虚寒症　阳虚证发病中的作用，探讨大建中汤可能的作用环节。　

候，由于脾主运化异常，导致相关消化系统功能紊乱，进而出现消　１材料与仪器　

化不良症状的病理状态。临床表现为畏寒、肢冷、乏力、消瘦、腹　１．１动物及分组健康成年清洁级ＳＤ雄性大鼠２８只，体质量　

许可证号ＳＣＸＫ　

痛、便溏及腹泻等。大建中汤出自《金匮要略》，是临床治疗脾胃　

２００～２２０ｇ（由重庆腾鑫生物技术有限公司提供，

２００７—０００８。置于安静，温度保持恒定（２２±２）℃，避免强　

虚寒症的常用方剂，临床疗效确切。目前对脾阳虚症的研究较多　

（渝）

集中在能量代谢、胃肠功能活动、血液中有关化学物质改变等方　光的环境中饲养３　ｄ。随机分为①正常对照组；②模型组；③大建　

按灌胃剂量分为两个剂量组，即大剂量组、小剂量　

面，脾阳虚症对神经系统作用的研究较少。下丘脑是对各种内脏　

中汤治疗组：

功能进行整合的较高级中枢，脾阳虚是否能影响下丘脑的神经活　

组，以上每组７只。

ｙｍｐｕｓ，Ｊａｐａｎ），ＧＦＡＰ　

动非常值得探讨。神经胶质细胞是组成神经系统数量最多的一　

１．２器材、试剂与药物ＢＸ一４１显微镜（Ｏｌ

ｎｇ　Ｋｏｎｇ），二步法免　

种细胞，研究表明神经胶质细胞激活后可释放多种化学物质，参　

（北京博奥森有限公司），０Ｘ４２（ａｂｃａｍ，Ｈｏ

ＰＶ一６００２），　

与多种复杂的神经系统功能…。本研究拟复制脾阳虚大鼠模　

疫组化试剂盒（北京中杉金桥公司产，ＰＶ一６００１、

型，观察与内脏活动密切相关的下丘脑组织中星形胶质细胞　

ＤＡＢ显剂（北京博奥森有限公司）。中药材均购自贵阳同济堂　

经贵阳中医学院方药教研室汪毅教授鉴定为正品。造模　

ＧＦＡＰ和小胶质细胞０Ｘ４２的表达变化，探讨神经胶质细胞在脾　

大药店，

用番泻叶水浸液制备：将番泻叶按１：１比例与水混合，于恒温水　

浴箱中７０％浸泡２４　ｈ，将浸得液用３层纱布过滤后在４℃冰箱中　

收稿日期：２０１２　１０－２７；修订日期：２０１２－１１－２６　

保存备用。治疗用药大建中汤的制备：蜀椒（炒去汗）：干姜：　

基金项目：贵州省自然科学基金资助（黔科合Ｊ字［２０１０］２１９２号）　

人参：饴糖（烊化）＝１：２：１：５，制备方法参照文献　，分别制　

作者简介：王慧（１９６７一），女（汉族），贵州贵阳人，现任贵阳中医学院基　

成大剂量（含生药１．５ｇ／ｍ１）、小剂量（含生药０．３７５ｇ／ｍ１）两种浓　

础医学院副教授，博士学位，主要从事中西医结合基础研究工作．　

通讯作者简介：陈继婷（１９５２一），女（汉族），江苏南京人，现任贵阳中医　

度水煎液。

学院基础医学院教授，硕士学位，主要从事《金匮要略》方证的实验和临床　

２方法　

２．１　造模根据我们以往实验的造模方法加以改进，造模过程分　

应用研究工作．　

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