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敏感的新试验检测单个肝细胞和血清中的乙型肝炎感染

2019-07-24 15:43:11 • 来源：

慢性乙型肝炎病毒(HBV)可发展为肝硬化和肝细胞癌(HCC)。发表在“分子诊断学杂志”上的一项研究描述了一种新的HBV检测方法，该检测方法优于目前使用的方法，因为它能够检测血清，单细胞和保存组织样本中的闭合环状DNA(cccDNA)。该测定可用于在较早阶段诊断HCC以更有效地管理治疗。

“HCC的发展与HBV密切相关。近年来，针对cccDNA的几种新的抗病毒策略已经建立，以提高HBV清除率。为cccDNA检测提供准确，灵敏的方法具有重要的临床意义。更多患有慢性HBV的患者将接受精确治疗以预防或延迟HCC的发生，患者的HCC可在早期诊断，“首席研究员刘松梅博士解释，中南基因诊断中心主任武汉大学医院，武汉，中国。

新的测定法使用液滴数字PCR(ddPCR)，它对于检测病毒等微量分子非常灵敏和准确。通过将ddPCR与PCR相结合，研究人员能够检测血清，单细胞和福尔马林固定，石蜡包埋的肿瘤问题中的cccDNA。Southern印迹，目前被认为是用于此目的的金标准，并且其他测定具有重要限制，例如在检测低拷贝数cccDNA时比ddPCR灵敏度低。其他方法需要通过肝脏活组织检查获得肝脏组织。“与肝活检相比，血清可以无创获得，广泛用于临床诊断目的，并具有均一的cccDNA分布。该检测也提高了cccDNA的检出限，”刘博士说。

ddPCR可用于鉴定哪些患者可能携带肝细胞癌。研究人员发现，68例HCC患者中近90%为cccDNA阳性，而79例非HCC患者为53%。与非HCC患者相比，HCC患者的血清cccDNA拷贝数更高。结合分析血清cccDNA和HBV-DNA鉴别HCC患者与非HCC患者。“这表明cccDNA是HCC的危险因素，”刘博士说。

研究人员还能够确认血清cccDNA与肝脏样本中测量的cccDNA水平正相关。“血清cccDNA确实是比肝内cccDNA更好，更有用的诊断标记，”刘博士说。最近，已发现几种靶向cccDNA的新抗病毒策略可改善HBV清除率。因此，为cccDNA检测提供准确，灵敏的方法对于早期诊断和HCC预测，靶向治疗和评估治疗效果具有重要的临床意义。

在随附的评论中，加拿大艾伯塔省埃德蒙顿大学实验医学与病理学系的医学博士，博士观察到，“ 血清 cccDNA和HBV-DNA的定量是区分HCC患者的有效方法。非HCC患者的敏感性为74.5%，特异性为93.7%。这是一项重要发现，可以早期诊断HCC，并以无创方式更准确地预测慢性HBV进展。

据世界卫生组织统计，全球有2.57亿人感染了HBV，2015年HBV导致887,000人死亡，主要原因是肝脏并发症。慢性HBV感染可以用替诺福韦或恩替卡韦等药物治疗。2015年，只有9%的HBV感染者知道自己被感染。

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