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中药金银花提取物降糖作用实验研究

-

2022年4月17日发(作者:如何查看qq加密相册)

-4-

ClinicalJournalofChineseMedicine2018Vol.(10)No.19

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作者简介:

胡青莲(1971-),山东东明人,主治医师。

编辑:弓良彦编号:EA-3180322239(修回:2018-07-07)

中药金银花提取物降糖作用实验研究

Experimentalstudiesonhypoglycemiceffectsofextractsfromhoneysuckle

叶清华

(湖北省荆门市掇刀人民医院,湖北荆门,

448124

R284

.

5

文献标识码:

A

文章编号:

1674

-

7860

2018

19

-

0004

-

04

中图分类号:

目的:探讨中药金银花提取物的降糖作用。方法:从四种金银花地方品种忍冬(LMPB)、山银花(LCPB)、红腺忍

摘要

冬(LHPB)、毛花柱忍冬(LFPB)的花蕾中提取多糖组分,采用链脲佐菌素(STZ)诱导制造

型糖尿病大鼠模型,设正常对照

组(NC),模型对照组(STZ),金银花阳组(STZ+LMPB;STZ+LCPB;STZ+LHPB;STZ+LFPB)。阳组每日分别

口服该四种提取物800mg/kg,共42天。观察各组大鼠血糖和胰岛素水平及血糖、血脂及代谢酶活性指标。结果:统计分析结果表

明:与对照组及模型组比较,阳组食物和水摄入量减少(

P

0.05,

P

0.01),血糖和胰岛素水平降低(

P

0.01,

P

0.05)。

同时总胆固醇(TC,45.8%

51.0%,

P

0.05),总甘油三酯(TG,50.6%

53.8%,

P

0.01),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,

71.2%

76.3%,45.2%

50.0%,,高密度脂蛋白胆固醇显著升高(HDL-C,

P

0.01)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C,

P

0.01)

21.6%

24.3%,

P

0.05)。同时阳物组血清ALT、AST和GGT显著降低(

P

0.05),肝脏CAT、SOD和GSH显著增加(

P

。结论:上述结果表明,四种中药金银花提取物多糖组分具有显著的降血糖作用,可作为

型糖尿病功能性食品的有效成分。

0.05)

金银花;多糖;降糖

关键词

】Ⅱ

型糖尿病;

Objective:ToinvestigatethehypoglycemiceffectofextractofJinyinghua(金银花).Methods:Polysaccharidefracti

Abstract

wereextractedfromthebudsoffourJinyinghua,LMPB,LPCB,eptozotocin(STZ)wasappliedtoestablishtypeII

diabeticratmodel,setthenormalcontrolgroup(NC),modelgroup(STZ),honeysucklepositivedruggroup(STZ+LMPB,STZ+LCPB,

STZ+LHPB,STZ+LFPB).Thepositivedruggroupwasgiventhefourextracts800mg/kgdaily,odglucoseandinsulin

levels,andtheindexesofbloodglucose,bloodlipids,s:Statisticalanalysis

CJCM

中医临床研究

2018

年第

10

卷第

19

-5-

showedthatcomparedwiththecontrolandmodelgroups,foodandwaterintakeinthepositivedruggroupweredecreased(

P<

0.05,

P<

0.01),

andbloodglucoseandinsulinlevelsweredecreased(

P<

0.01,

P<

0.05).Atthesametime,totalcholesterol(TC,45.8%~51.0%,

P<

0.05),total

triglycerides(TG,50.6%~53.8%,

P<

0.01),lowdensitylipoproteincholesterol(LDL-C,71.2%~76.3%,

P<

0.01)andverylow-densitylipoprotein

cholesterol(VLDL-C,45.2%~50.0%,

P<

0.01),high-densitylipoproteincholesterolweresignificantlyincreased(HDL-C,21.6%~24.3%,

P<

0.05).

SerumALT,AST,andGGTinthepositivedruggroupweresignificantlylower(

P<

0.05),andliverCAT,SOD,andGSHweresignificantly

increased(

P<

0.05).Conclusion:TheaboveresultsindicatethatthepolysaccharidecomponentsofthefourextractsofJinyinghuahavesignificant

hypoglycemiceffects,andcanbeusedaseffectiveingredientsoftypeIIdiabetesfunctionalfoods.

Jinyinghua;Amylose;TypeIIdiabetes;Gibenclamide

Keywords

doi:10.3969/.1674-7860.2018.19.002

糖尿病是全球公共卫生关注的一种主要的内分泌疾病,

其特点是体内产生胰岛素功能缺陷(Ⅰ型糖尿病,

T1DM

或胰岛素(Ⅱ型糖尿病,

T2DM

)[1

,2]。

T2DM

已严重威胁

人们的健康状况,其占所有糖尿病的

90%

95%

,其特征

是持续高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受

不良和受损[3,4]。然而,尽管临床上已有治疗和控制

T2DM

的药物,如双胍类、磺酰脲类和葡萄糖苷酶抑制剂,这些药

物的长期使用可能导致一些副作用,包括低血糖,肝肾功能

障碍[5

,6]。因此,随着

T2DM

发病率的不断上升,寻找新的

替代治疗方法来预防和治疗

T2DM

迫在眉睫。

药用植物多糖是由从天然药用植物中分离的,由糖苷

键聚合

10

个以上到上万个的单糖及单糖衍生物的具有一定

生物活性的高分子化合物,其不仅可作为能量资源及组织

细胞的结构物质,而且还参与和介导了对各种生命现象的

调控,具有抗寄生虫、抗肿瘤、抗菌、降血糖、抗氧化、

抗病毒、抗血栓、抗辐射、抗衰老、降血脂、免疫调节等

作用[7]。金银花是我国传统的药食两用植物,主要含有绿

原酸、类黄酮等生理活性成分。中医认为金银花具有抗菌、

抗氧化、增强免疫、保护肝功能等诸多功效,目前对金银

花已有较广泛和深入的研究,但其是否具有降血糖的作用,

目前还未见研究报道。本文从四种金银花中提取多糖成分,

旨在探讨四种金银花多糖的抗糖尿病作用,为

T2DM

中药

研发提供理论依据。

1

材料与方法

1.1多糖的来源

试验所用四种金银花多糖由荆楚理工学院生物学院提取

并鉴定,多糖采用水提醇沉的方法提取,由硫酸

-

苯酚法测

定四种多糖的含量。将提取后的多糖用去离子水稀释成所需

要的浓度,于

4

℃冰箱保存备用。

1.2试验动物、试剂及仪器

试验动物:健康雄性大鼠[荆楚医动字(新)jcut

2016-0013]

96

只进行造模。适应性喂养一周,禁食不禁

20h

,采用链脲佐菌素(

STZ

)腹腔注射造模。一周后

大鼠空腹血糖≥

16.7mmol/L

即为造模成功。金银花品种

购于荆门市药材供销公司,

STZ

购于

Sigma

公司,大鼠

尿蛋白定量试剂盒、

TG

试剂盒、

T-CHO

试剂盒和

AGEs

ELISA

检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

1.3试验设计

试验分组如表

1

所示。

1

试验设计(

mg

/

L

处理

忍冬山银花红腺忍冬毛花柱忍冬

(LMPB)(LCPB)(LHPB)(LFPB)

空白对照组(NC)0000

模型对照组(STZ)0000

LMPB阳物组

(STZ+LMPB)

60000

LCPB阳物组

(STZ+LCPB)

06000

LHPB阳物组

(STZ+LHPB)

00600

LFPB阳物组

(STZ+LFPB)

00060

1.4测定指标

血清胰岛素含量的测定:通过竞争性抑制法测定血清胰岛

素,

ELISA

方法按照试剂盒制造商的说明进行。

血脂含量的测定:大鼠处死后取血

4

℃条件下静置

2h

,离

心收集血清,按试剂盒说明书测定血清

TG

TC

LDL-C

VLDL

HDL-C

水平。

血清和肝脏关键激酶的测定:大鼠处死后取血清,检测

2

型糖尿病大鼠糖代谢关键酶丙氨酸转氨酶(

ALT

)、天冬氨酸

转氨酶(

AST

)、

γ-

谷氨酰转肽酶(

GGT

)活性,取肝脏组织

检测过氧化氢酶(

CAT

)、超氧化物歧化酶(

SOD

)和谷胱甘

肽酶(

GSH

)活性,酶活性测定采用南京建成生物工程研究

所试剂盒说明方法进行。

1.5统计分析

采用

SAS9.2

软件中的

GLM

对本试验的数据进行统计分

析,所有试验数据均采用(平均数±标准差)来表示。以

P

0.05

表示显著性差异具有统计学意义,用

Duncan

氏法作

多重比较。

2

结果

2.1不同金银花多糖处理对大鼠血糖、胰岛素和胰岛素受体的影响

如表

2

所示,与正常对照组相比,

STZ

诱导的糖尿病

大鼠胰岛素水平显著升高(

P

0.05

),而血糖和胰岛素受

HOMA-IR

P

0.01

)极显著增加;口服

LMPB

LHPB

LFPB

LCPB

42

天后,与

STZ

模型组比较,各给药组胰

岛素水平显著降低(

P

0.05

),血糖和

HOMA-IR

极显著降

低(

P

0.01

)。说明这些多糖组分能够抑制糖尿病大鼠空腹

血糖和改善胰岛素抵抗。

-6-

ClinicalJournalofChineseMedicine2018Vol.(10)No.19

2

不同金银花多糖组分对

2

型糖尿病大鼠血糖胰岛素和胰岛素受体的影响

处理

空白对照组(NC)

模型对照组(STZ)

LMPB阳物组(STZ+LMPB)

LCPB阳物组(STZ+LCPB)

LHPB阳物组(STZ+LHPB)

LFPB阳物组(STZ+LFPB)

血糖(0d)

6.5±0.2

22.4±2.1**

22.8±2.2*

20.9±2.1*

21.2±2.1*

21.8±1.9*

血糖(42d)

7.1±0.2

23.1±2.4**

12.8±1.1*

12.2±1.2*

11.7±1.4*

12.7±1.2*

胰岛素(42d)

24.3±1.9

32.4±1.8*

24.0±1.8

24.2±1.9

23.9±2.4

24.2±1.6

胰岛素受体HOMA-IR(42d)

7.7±0.5

39.9±4.1**

14.1±1.6*

12.4±1.5*

13.6±1.6*

14.2±1.5*

注:“*”表示差异显著(

P

<0.05),“**”表示差异极显著(

P

<0.01),未标者差异不显著(

P

>0.05);以下各表同。

2.2不同金银花多糖处理对大鼠血脂水平的影响

由表

3

可知,与空白对照组比较,

2

型糖尿病大鼠模型

组血浆

TG

TC

VLDL

HDL-C

均极显著升高(

P

0.01

)。

LMPB

LHPB

LFPB

LCPB

治疗

T2DM

后,其

TG

TC

VLDL-C

HDL-C

组显著降低,分别为

45.8%

51.0%

50.6%

53.8%

71.2%

76.3%

45.2%

50.0%

。此外,

3

不同金银花多糖处理对大鼠血脂水平的影响

处理

空白对照组(NC)

模型对照组(STZ)

LMPB阳物组(STZ+LMPB)

LCPB阳物组(STZ+LCPB)

LHPB阳物组(STZ+LHPB)

LFPB阳物组(STZ+LFPB)

TC(mmol/L)

1.53±0.14

3.10±0.22**

1.61±0.19*

1.66±0.22*

1.68±0.19*

1.52±0.22*

2

型糖尿病对照组与正常对照组比较,

HDL-C

明显降低

P

0.05

)。然而

LMPB

LHPB

LFPB

LCPB

治疗后

HDL-C

显著升高(

P

0.05

),增加了

21.6%

24.3%

。说明

这四种多糖组分对血脂异常、动脉粥样硬化、冠心病等糖尿

病并发症有明显的治疗作用。

TG(mmol/L)

1.65±0.14

3.40±0.23**

1.68±0.10*

1.60±0.11*

1.57±0.11*

1.58±0.15*

HDL-C(mmol/L)

0.92±0.09

0.74±0.11**

0.90±0.13**

0.90±0.17**

0.91±0.16**

0.92±0.13**

LDL-C(mmol/L)VLDL-C(mmol/L)

0.31±0.07

1.56±0.24**

0.37±0.10*

0.45±0.11*

0.45±0.11*

0.39±0.10*

0.30±0.07

0.62±0.12**

0.34±0.09*

0.32±0.06*

0.31±0.08*

0.32±0.09*

2.3不同金银花多糖处理对大鼠关键代谢酶活性的影响

如表

4

所示,与正常对照组相比,糖尿病大鼠(

STZ

)丙

氨酸转氨酶(

ALT

)、天冬氨酸转氨酶(

AST

)、

γ-

谷氨酰转肽

酶(

GGT

)活性各极显著升高了

4.2

倍(

P

0.01

),

5.0

倍(

P

0.01

)及

3.3

倍(

P

0.01

)。口服

LMPB

LHPB

LFPB

LCPB

42

天后,与

STZ

模型组比较,阳物组大鼠血清

ALT

AST

GGT

活性极显著降低至(

52.9

±

9.6

)~(

56.2

±

7.0

IU/LIU/L

P

0.01

),(

73.7

±

13.2

)~(

78.8

±

16.1

)(

P

0.01

4

不同金银花多糖处理对大鼠关键代谢酶活性的影响

处理

空白对照组(NC)

模型对照组(STZ)

LMPB阳物组(STZ+LMPB)

LCPB阳物组(STZ+LCPB)

LHPB阳物组(STZ+LHPB)

LFPB阳物组(STZ+LFPB)

血清ALT

42.1±5.1

170.8±9.62.1**

56.2±7.0*

52.9±9.6*

55.7±6.9*

55.8±6.9*

血清AST

72.1±11.2

363.1±22.4**

78.8±16.1*

76.2±14.2*

73.7±14.4*

73.7±13.2*

IU/L

和(

43.9

±

6.4

)~(

44.2

±

6.9

)(

P

0.01

)。与正常对照组

STZ

诱导的糖尿病大鼠血清中

HK

SDH

MDH

活性均比较,

有显著性差异(

P

0.01

P

0.01

)和

P

0.05

)。口服

LMPB

LHPB

LFPB

LCPB

42

天后,与

STZ

模型组比较,糖尿病大

鼠肝脏过氧化氢酶(

CAT

)、超氧化物歧化酶(

SOD

)和谷胱甘肽

酶(

GSH

)活性含量显著分别升高至(

82.4

±

8.5

)~(

84.2

±

8.5

U/mgU/mg

P

0.01

)、(

297.3

±

12.5

)~(

302.7

±

13.6

)(

P

0.01

和(

9.4

±

0.4

)~(

9.8

±

0.4

mg/g

P

0.05

)。

血清GGT

41.3±4.9

136.4±9.8**

44.0±6.8*

44.2±6.9*

43.9±6.4*

44.2±6.6*

肝脏CAT

87.7±6.5

29.9±7.1**

84.1±8.6*

82.4±8.5*

83.6±8.6*

84.2±8.5*

肝脏SOD

302.9±11.4

168.6±12.1**

302.2±13.4*

297.3±12.5*

301.8±11.9*

302.7±13.6*

肝脏GSH

9.9±0.6

4.7±0.5**

9.8±0.4*

9.4±0.4*

9.5±0.5*

9.5±0.5*

3

讨论

由以上结果可知,本试验所得的四种金银花多糖组分能

够调控

2

型糖尿病模型大鼠空腹血糖表达和改善胰岛素抵

抗。本报道表明忍冬(

LMPB

)、山银花(

LCPB

)、红腺忍冬

LHPB

)、毛花柱忍冬(

LFPB

)可被用作日本落叶松的替代

品,用于中医治疗

T2DM

。以前有报道指出,金银花中绿原

酸、类黄酮类物质对

THP-1

细胞中的胆固醇和类黄酮显示出

强烈的抗动脉粥样硬化作用[8],本研究证实该四种金银花多

糖在血脂异常与心血管疾病方面的预防作用,且这种预防作

用来自于多糖成分。本研究为深入开展金银花的药效物质基

础研究奠定了基础,同时也为金银花组分配伍降血糖新药开

发提供了理论依据。

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作者简介:

叶清华(1966-),主治医师,从事内科临床工作15年,先后

在武汉同济医院、湖北省人民医院等医院进修学习,擅长心血管、内

分泌、肾内科等系统疾病的诊断和治疗。

编辑:田杏茹编号:EA-4180403019(修回:2018-07-08)

通腹饮对腹腔内高压症危重患者的腹内压变化率及

炎性因子的影响研究

EfficacyofTongfuYinonintra-abdominalpressurechangerateand

inflammatoryfactorsofpatientswithsevereintra-abdominalhypertension

谷欣刘敏桑云华龙宏杰

(广州医科大学附属惠州医院,广东惠州,

516000

R322

.

2+7

文献标识码:

A

文章编号:

1674

-

7860

2018

19

-

0007

-

04中图分类号:

目的:探讨通腹饮对腹腔内高压症(IAH)危重患者的腹内压变化率及炎性因子的影响。方法:本研究选取48例IAH

摘要

危重患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组各24例,对照组给予常规治疗,观察组在此基础上给予通腹饮治疗,观察两组治

疗前后IAH分级、临床指标、腹内压变化率、急性生理学与慢性健康状况评分

(APACHE

)、血清炎性因子变化,并统计不良反

应发生率及28天病死率。结果:治疗后两组IAH分级均明显优于治疗前(

P

0.05),观察组明显优于对照组(

P

0.05);治疗后两

组eGFR均明显升高(

P

0.05),观察组明显高于对照组(

P

0.05),且观察组肠鸣音恢复时间、首次排便时间、ICU住院时间均明

显短于对照组(

P

0.05);治疗后两组APACHE

评分均明显降低(

P

0.05),观察组明显低于对照组(

P

0.05),且观察组腹内

压变化率明显小于对照组(

P

0.05);治疗后两组血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-

α

(TNF-

α

)、白细胞介素-6(IL-6)、

降钙素原(PCT)水平均明显降低(

P

0.05),观察组各因子水平明显低于对照组(

P

0.05);观察组不良反应发生率明显低于对照

组(

P

0.05),两组28d病死率比较无明显差异(

P

0.05)。结论:通腹饮治疗IAH危重患者能够有效降低腹内压变化率及血清炎

性因子水平,促进患者胃肠功能恢复,保护肾功能,且不良反应发生率及28d病死率低,临床疗效较好。

通腹饮;腹腔内高压症;腹内压变化率;炎性因子

关键词

Objective:ToinvestigatetheefficacyofTongfuYin(通腹饮)onintra-abdominalpressurechangerateandinflammatory

Abstract

s:48caseswereselectedastheresearchsubjectsandwererandomlydividedintothecontrol

groupandtheobservationgroup,ervationgroupwastreated

classification,clinicalindex,intra-abdominalpressurechangerate,acutephysiology,APACHEIIand

seruminflammatoryfacersereactiand28days

s:Aftertreatment,theIAHclassificatiintwogroupsweresignificantlybetter(

P<

0.05),

andthatintheobservationgroupwasobviouslysuperiortothecontrolgroup(

P<

0.05).Aftertreatment,theeGFRintwogroupswas

significantlyincreased(

P<

0.05),andthatintheobservationgroupwassignificantlyhigherthanthecontrolgroup(

P<

0.05).Therecovery

timeofbowelsound,thefirstdefecationtime,ICUhospitalizationtimeintheobservationgroupweresignificantlyshorterthanthosein

thecontrolgroup(

P<

0.05).Aftertreatment,thescoresofAPACHEIIintwogroupsweresignificantlydecreased(

P<

0.05),andthatinthe

observationgroupwassignificantlylowerthanthecontrolgroup(

P<

0.05).Thechangerateofintra-abdominalpressureintheobservation

groupwassignificantlylowerthanthatinthecontrolgroup(

P<

0.05).Aftertreatment,hs-CRP,TNF-

α

,IL-6andPCTlevelsintwogroups

weresignificantlydecreased(

P<

0.05),andthoseintheobservationgroupweresignificantlylowerthanthoseinthecontrolgroup(

P<

0.05).

Adversereactiintheobservationgroupweresignificantlyfewerthanthecontrolgroup(

P<

0.05).Therewasnosignificantdifferenceof

the28daysmortalityratebetweentwogroups(

P>

0.05).Conclusion:TongfuYincaneffectivelyreducethechangerateofintra-abdominal

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