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肺炎支原体IgM抗体检测SOP

一、检验目的

规范实验室人员操作，以保证实验结果的准确性。

二、预期用途

该产品用于定性检测血清、血浆或全血中的肺炎支原体IgM抗体。是引起社区获得性

呼吸道感染的主要病原体之一，可以导致支气管炎和非典型性肺炎。主要引起人非典型肺

炎、气管炎及支气管炎，多经口和呼吸道等途径传播，多发于儿童和青年人。MP感染已占

小儿呼吸道疾病30%以上，且有增加趋势。感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和

IgG抗体。IgM抗体出现早，一般在感染后1周出现，3~4周达高峰，以后逐渐降低。再

次感染或重复感染后，常在1-2周内出现较高水平的IgG抗体。MP肺炎与一般呼吸道感染

和肺炎的临床症状没有明显区别，MP感染早期诊断有利于MP肺炎的治疗。血青学诊断法

是临床常用的主要诊断方法之一，灵敏度和特异性适中，常用的主要有酶联免疫吸附试验

和凝集试验。

三、检验原理

本产品以胶体金作为指示标记，用胶体金标记抗人IgM单抗，以基因工程技术表达肺

炎支原体P1蛋白抗原标被硝酸纤维素膜，应用“间接法”免疫层析技术原理，检测的肺炎

支原体感染病人血清、血浆或全血中的肺炎支原体抗体IgM,在检测过程中，若样本中存在

肺炎支原体抗体gM,则肺炎支原体抗体1gM与样本吸附垫中的胶体金一抗人IgM单抗结合

物形成复合物，复合物沿硝酸纤维素膜移动到检测区，与检测线上包被的肺炎支原体P1蛋

白抗原结合，多余的未被结合的结合物继续移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG

抗体结合，反应膜上出现1条红的检测线和1条红的质控线；若样本中不存在肺炎支

原体抗体IgM,则胶体金一抗人IgM单抗结合物直接沿硝酸纤维素膜移动到质控区，与质控

线上包被的羊抗鼠IgG抗体结合，仅形成一条红的质控线。

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四、主要组成成份

1、试剂盒组分

包括肺炎支原体1gM抗体检测卡，样品稀释液。

1.1、检测卡主要组分：包括金标垫和硝酸纤维素检测膜，金标垫内包被有胶体金

标记的抗人IgM单克隆抗体；硝酸纤维素检测膜的检测线上包被有基因工程技术表达的肺

炎支原体P1蛋白抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。

1.2、样品稀释液主要成分：PBS缓冲液。

2、每盒产品内含肺炎支原体1gM抗体检测卡，共25人份，单人份/袋均加干燥剂

单独密封包装；样品稀释液1瓶，7mL/瓶：

同种产品不同批号试剂盒的稀释液在有效期内可互换使用。

五、储存条件及有效期

产品储存应在4℃~30℃条件下，通风、避光、干燥处，禁止冷冻；有效期18个

月。生产日期和有效期见标签。

六、样本要求

1、本试剂盒仅适用于血清、血浆或全血样本。

2、血浆样本适用的抗凝剂为肝素或EDTA.

3、样本应收集于洁净、干燥的容器中。

4、严重溶血的样本必须重新采集血样。

5、样本收集后应尽可能马上使用，不能在室温下长时间存放，血清、血浆或全血

样本可在2-8℃冷范存放7天，血清或血浆长期保存需冷冻于-20摄氏度，冷藏或冷冻

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样本应在检测前恢复到室温并充分混匀，样本切忌反复冻使用。

七、检测方法

1、样本收集

血清血浆或者全血做检测样本，可直接使用，若收集临床分离新鲜血清做检测样本，

分离新鲜血清样本要在1h内完成检测，超过1h需2-8℃保存，2-8℃保存时间不超过7

天。

2、检测方法

将包装袋沿缺口处撕开，取出检测卡，平放，在检测卡右端的加样孔中加10nL的样本，

再加100uL样品稀释液，3-5分钟后可观察检测卡中部金视窗的结果，20分钟内判读结果

有效。

八、检验结果的解释

阳性：在观察窗C、T处各出现一条红线。

阴性：仅在观察窗C处出现一条红线。

无效：在观察窗C处无红线出现，表明试验失败或试剂失效。在任何情况下，

应重新检测，如果问题仍然存在，应停止使用该批号产品，并与当地供应商联系。

九、检验方法的局限性

1、本检测卡仅适用于新鲜血清、血浆或全血样本。

2、由于受试剂盒检测最低检出量的限制，如样本中抗体浓度过低，可能得出不正

确的阴性结果。

3、肺炎支原体1gM抗体检测试剂盒(胶体金法)只能定性检测肺炎支原体抗体IgM

的存在，不能确定样本中抗体的具体含量。

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4、本产品检测结果仅供临床参考，不应作为临床诊治的唯一依据，对患者的临床

管理应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查(尤其是病原学检测)、治疗反应及流行病

学等信息综合考虑。

5、感染初期，肺炎支原体1gM抗体未产生或滴度很低会导致阴性结果，如怀疑有

病原体感染，应提示患者在7-14天内复查，抽取第二份样本，并和第一份样本在同条件下

同时检测，以确定是否有初次感染的血清转化或肺炎支原体IgG抗体滴度4倍升高。

6、由于孕妇的实验室检查不能可靠地鉴定胎儿患病的风险，故不建议采用本试剂

对无症状的母体感染进行筛查，不得将本试剂的检测结果单独作为终止妊娠的依据。

7、免疫功能受损或接受免疫抑制治疗治疗的患者，如人类免疫缺陷病毒（HIV）感染

者或器官移植后接受免疫抑制治疗的患者，其血清IgM抗体检测的参考值有限，可能会导

致错误的医学解释。

8、在近几个月内接受过输血或其他血液制品治疗的人，对其阳性检测结果的分析应

慎重。

9、肺炎支原体IgM抗体不仅出现于初次感染，当二次感染和复发感染时也可能出

现。

10、当疾病的流行程度降低时阳性预测值降低，对低危人阳性结果的解释应当

谨慎，本试剂对适用人的性别、年龄及地域特征没有特殊要求。

十、产品性能指标

1、符合率：同批号的试剂盒检测10份符合率阳性参考品及10份符合率阴性参考

品，阳性符合率及阴性符合率均不低于100%.

2、精密度：企业中强阳性、弱阳性参考品检测结果均为阳性，显均一，企业阴

性参考品检测结果均为阴性。

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3、最低检出量：同批号的试剂盒检查1:8倍稀释的最低检出量阳性参考品，检测

结果为阳性，显均一。

4、交叉反应：未发现本品与腺病毒IgM抗体、肺炎衣原体IgM抗体、柯萨奇B病

毒IgM抗体、呼吸道合胞病毒IgM抗体、弓形虫IgM抗体、乙型肝炎核心抗体、丙型肝炎

抗体和巨细胞病毒IgM抗体阳性血清有交叉反应。

5、干扰试验：血红蛋白浓度为4g/L的溶血、甘油三酯浓度为5mmol/L的脂血、

胆红素浓度为140umol/L的黄疸、类风湿因子浓度为200IU/mL的类风湿、浓度为26g/L的

高浓度非特异性IgG抗体、浓度为11g/L的高浓度非特异性IgM抗体，或低于上述浓度，

对检测结果无干扰。本试剂盒不受抗核抗体、抗线粒体抗体的干扰。

6、HO0K效应：阳性血清1:8倍稀释后检测为阳性，原倍血清检测亦为阳性，未出

现钩状效应。

7、IgM类类风湿因子和高效价肺炎支原体IgG抗体不对本品的检测产生干扰。

8、药物干扰：左氧氟沙星不对本品检测产生影响。

十一、注意事项

1、本品如在冰箱中储存，取出后应充分复温(至室温)再打开包装使用。

2、使用前不能浸湿测试板或触摸反应膜。

3、包装袋内有干燥剂，不得内服。

4、产品为一次性使用，仅用于体外诊断，用过的检测卡以及采样、加排过程中使

用的一次性器皿应按处理医疗垃圾的相关规定进行处理。

5、如出现阴性结果，但症状仍然存在者应采用其他诊断方法。

6、检验一旦开始操作，应按操作步骤连线进行，直至结束。

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7、试剂盒应贮存在4℃-30℃通风、干爆处，禁止冷冻。

十二、参考文献

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