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自动化测定化学介导的细胞毒性机制

2019-07-10 08:50:07 • 来源：

基于体外细胞的测定是评估测试化合物毒性的合适且经济的方法，特别是在药物发现研究计划中。通常的工作流程包括测试化合物滴定，应用于细胞和孵育数天。所有的细胞毒性测定特异性液体处理任务是通过使用CyBio进行® FELIX(耶拿)仪器作为一个独立的，完全自动化的系统。

自动化测定化学介导的细胞毒性机制

通过使用开发用于定量感兴趣的生物标志物的试剂来评估测试化合物的效果。简而言之，产生细胞毒性作用的化合物或治疗通过引起显着的形态变化，负面影响复制速率或导致可行细胞计数减少而这样做。从体外方法获得的信息是识别潜在毒性问题的重要前体。在机械细胞毒性分析中，使用独特的生物标志物来报告细胞的健康状况。在本文中，使用一组三个测定来评估与细胞数量，细胞凋亡和膜完整性(细胞毒性)的变化相关的生物标志物。

当组合使用时，这些生物标志物可以帮助区分凋亡，坏死或生长停滞的细胞群。表1描述了用于该研究的测定。

所述CellTox ™绿色测定法与胱天蛋白酶-GLO多路复用® 3/7测定或的CellTiter-GLO ® 2.0，以减少样品处理和保存细胞样品。胱天蛋白酶格洛的检测化学® 3/7和的CellTiter-GLO ®2.0是不兼容的。因此，组装一式两份样品以分别评估细胞凋亡和细胞活力。对于这种分析工作流程，与连续培养的细胞相比，冷冻，解冻和使用细胞提供了合适的选择。解冻并使用这些解冻和使用的细胞，并在解冻后直接接种，不需要任何先前的细胞培养活性。融合和传代数可以影响培养细胞的生物学性能，使用解冻和使用细胞可以克服这些挑战。

通过将实验室自动化用于所有实验步骤，使得分析工作流程更有效。本文介绍了自动连续滴定和将测试化合物应用于测定板，以及添加试剂和细胞。结合自动化保证了可靠的实验设置，避免了用户对用户移液的可变性并提高了实验室效率。

对于这种应用，冷冻即时的HepG2细胞(细胞培养服务)，人肝细胞系，GloMax ®用于检测荧光和发光测定信号的查询多模检测系统(Promega)，和一个CyBio ®菲利克斯仪器为所有液体处理步骤已经受雇了。为了采用这种自动化分析过程，用于实验步骤的最短时间和注意力就足够了。自动化过程允许在384孔微孔板格式中一式四份地测试多达八种化合物。当优选时间过程研究时，可以组装复制的板。

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