食品毛ｉｆ究与羿发　

分离提取　

ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１３．０９．０１１　

Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　

２０１３年５月　

第３４卷第９期　

４１＝＝．Ｉ　

金银花中黄酮类化合物的提取工艺　

贾霖，黄国清，肖军霞‘　

（青岛农业大学食品科学与工程学院，山东青岛２６６１０９）　

摘要：采用乙醇提取金银花中的黄酮。通过单因素试验研究了乙醇体积分数、浸提温度、浸提时间和料液比对黄酮　

浸提量的影响。在此基础上，选择乙醇体积分数、浸提温度和料液比进行正交试验，得到金银花中黄酮类化合物的最　

佳提取工艺，即采用体积分数为６０％的乙醇按照１：１５（ｇ／ｍＬ）料液比在６０℃下浸提４ｈ，最大提取率达到１０．４９％。　

关键词：金银花；黄酮类化合物；提取　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ　

ＪＩＡ　Ｌｉｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｇｕｏ—ｑｉｎｇ，ＸＩＡ０　Ｊｕｎ－ｘｉａ　

（Ｃｏｌｌｅｇｅｏｆ　ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＱｉｎｇｄａｏＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６１０９，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｆａｃｔｏｒｓ　

ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅｓ，ａｎｄ　ｍａｔｅｒｉａ１／　

ｓｏｌｖｅｎｔ　ｒａｔｉｏ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　

ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｌｃｏｈｏｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｍａｔｅｒｉａｌ／ｓｏｌｖｅｎｔ　ｒａｔｉｏ　ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｂｙ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　

ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：ａｌｃｏｈｏｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　６０％，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　

６０℃，ｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　１：１　５，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｉｍｅ　４　ｈ，ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１０．４９％．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　

金银花为忍冬科植物忍冬（Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ａｐｏｎｉｃａ　

ｈｕｍｂ．Ｔ）、红腺忍冬（Ｌ　ｈｙｐｏｇｌａｕｃａＭｉｑ）、山银花（Ｌ　ＣＯｎ一　

亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钙等均为分析纯。　

１．２主要仪器与设备　

ｓＨｚ—ＩＩＩ型真空循环水真空泵，旋转蒸发仪ＲＥ一　

５２Ｂ：上海亚荣生化仪器厂；ｕＶ一２０００紫外分光光度　

计：上海尤尼科仪器有限公司；分析天平：上海奥豪斯　

公司。　

１．３试验方法　

触０ＤＣ）或毛花柱忍冬（Ｌ　ｄａｓｙｓｔｙｌａＲｅｈｄ）的干燥花蕾或　

带初开的花ｌｌ１。金银花商品药材主要来源为栽培品种，河　

南、山东是传统的金银花产地和栽培地。金银花为临床　

常用中药，具有清热解毒，凉散风热之攻效，主治痈肿　

疗疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发势等［２１。而　

黄酮类化合物是金银花的主要成分圈。本文利用乙醇回　

流浸提法对金银花中的黄酮类物质进行提取，借助于　

正交试验，研究金银花中黄酮类化合物的最佳提取工　

艺，为金银花中有效成分的提取提供理论基础。　

１材料与方法　

１．３．１黄酮的提取工艺　

金银花一干燥一粉碎一乙醇回流一抽滤一减压　

浓缩一定容测定吸光度一计算总黄酮类物质的含量　

１．３．２黄酮含量的分析检测方法　

参考丁利君等的方法：用乙醇溶解芦丁标准试　

剂，取不同体积的芦丁标准液，加入ＮａＮＯ　、ＡＩ（ＮＯ　）　

和ＮａＯＨ，于波长５００　ｎｍ处测定，试剂为空白，测得不　

１．１主要材料与试剂　

金银花：购于青岛同方药业。无水乙醇，氢氧化钠，　

作者简介：贾霖（１９８６＿），男（汉），在读硕士研究生，研究方向：食品　

功能性成分及微胶囊化。　

同浓度下的吸光度值，制作标准曲线。　

１．３－３不同因素对金银花黄酮提取量的影响　

取适量金银花经过干燥粉碎之后，选用一定体积　

分数的乙醇回流提取一段时间，抽滤，将滤液减压浓　通信作者：肖军霞（１９７７一），女（汉），副教授，硕士生导师。　

贾霖，等：金银花中黄酮类化合物的提取工艺　分离提取　

．＝＝　２　

缩，根据１．３．２方法测定金银花黄酮提取量。试验中通　

过调整乙醇体积分数、浸提温度、料液比和浸提时　

间＿５＿　来分析不同因素对黄酮提取量的影响。　

１．３．４金银花黄酮提取优化试验　

选定乙醇体积分数、浸提温度、料液比３个因素，　

设计了三因素三水平的正交试验来优化金银花黄酮　

提取的工艺参数，其正交试验因素水平见表１。　

表１正交试验因素水平表　

Ｔａｂｌｅ　１　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　

２结论与讨论　

２．１单因素试验　

２．１．１　乙醇体积分数对黄酮提取量的影响　

称取金银花粉末５．０　ｇ，选取乙醇体积分数２０％、　

４０％、６０％、８０％、１００％以１：１０ｇ／ｍＬ的料液比在７０℃　

回流浸提１次，时间为２　ｈ。乙醇体积分数对黄酮提取　

量的影响见图１。　

皿吲　

把　

爵　

乙醇体积分数，％　

图１　乙醇体积分数对黄酮提取量的影晌　

Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｌｆａｖｏｎｏｉｄｓ　

随着乙醇体积分数的增加，黄酮提取率也相应提　

高，最大值为７．１％，但乙醇体积分数超过８０％后，黄酮　

提取率反而降低。这可能是由于高浓度的乙醇限制了　

某些黄酮类物质的溶出。　

２．１．２浸提温度对黄酮提取量的影响　

称取金银花粉末５．０　ｇ，选取提取温度为２０、４０、６０、　

８０、１００　ｏ【＝，乙醇体积分数８０％，料液比１：１０　ｇ／ｍＬ，　

浸提１次，时间为２　ｈ。浸提温度对黄酮提取量的影响　

结果见图２。　

黄酮提取最大值为６．８％，由于黄酮类化合物是　

一种天然的抗氧化剂，故其本身易在高温下氧化。由　

图２可知，当温度在６０℃　８０　ｏＣ之间时黄酮的提取率　

最高，超过８０℃黄酮的提取率则下降，这可能是由于　

札　

匿　

瓤　

２０　４０　６０　８０　１００　

温度／℃　

图２温度对黄酮提取量的影响　

Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｌｆａｖｏｎｏｉｄｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　

在高温下黄酮被部分氧化了的原因。　

２．１．３料液比对黄酮提取量的影响　

称取金银花粉末５．０ｇ，选取料液比１：５、１：１０、１：　

１５、１：２０、１：２５　ｇ／ｍＬ，乙醇体积分数８０％，７０℃下浸　

提１次，浸提时间２　ｈ。料液比对黄酮提取量的影响结　

果见图３。　

斑Ｉ　

如　

匿　

掘　

料液比／【ｇ／ｍＥ）　

图３料液比对黄酮提取量的影响　

Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ／ｓｏｌｖｅｎｔ　ｒａｔｉｏ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｌｆａｖｏｎｏｉｄｓ　

ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　

黄酮类化合物提取方法中传统的溶剂有水和有　

机溶剂，而有机溶剂中最常用的又是乙醇和甲醇。在　

用溶剂提取时，适当加大料液比，可将更多的被提取　

物质提取出来。用乙醇提取金银花中的黄酮时，随着　

料液比的加大，黄酮提取率也加大，但当料液比超过　

１：１５　ｇ／ｍＬ时，黄酮的提取率增加不大，提取率最大值　

为７．１％。　

２．１．４浸提时间对黄酮提取量的影响　

称取金银花粉末５．０　ｇ，选取提取时间１、２、３、４、５　ｈ，　

乙醇体积分数８０％，料液比１：１０　ｇ／ｍＬ，７０℃下浸提　

１次。浸提时间对黄酮提取量的影响结果见图４，随着　

溶剂在金银花中的渗入，黄酮类化合物溶于有机溶剂　

而被提取出来。适当的增加浸提时间，可使被提取物　

质更多的溶出。　

由图４可见，在当提取时间为１　ｈ－４　ｈ时，黄酮提　

取率最高达到５．１１％；当提取时间超过４　ｈ，由于黄酮　

长时间暴露在７０℃的温度下，黄酮被部分氧化，从而　

导致提取率降低。　

分离提取　贾霖，等：金银花中黄酮类化合物的提取工艺　

４３＝＝＝＝Ｉ　

堡　

皿皿｛　

《ｒⅡ　

器　

～表一～一～№　一一～　。　。。　４　。　，　一。，　一一一　一㈣　６０　ｏ【＝，乙醇体积分数６０％，料液比１：１５　ｍＬ。正交试　

三因素的最优水平组合为Ａ　Ｂ。Ｃ：，即浸提温度　

验中黄酮提取率最高的是７号试验：即Ａ　Ｂ　ｃ　，提取温　

度为８０　ｃＣ，乙醇体积分数为６０％，料液比为１：２０咖Ｌ，　

粗　

１　２　３　４　５　

提取时间／｝Ｉ　

图４浸提时间对黄酮提取量的影响　

Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｌｆａｖｏｎｏｉｄｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　

２．２黄酮提取条件优化　

利用乙醇提取金银花中黄酮类化合物的正交试　

验结果见表２。　

经正交试验结果（表２）分析表明，利用乙醇提取　

金银中的黄酮类物质时，上面的三种因素影响的顺序　

为Ｃ＞Ａ＞Ｂ，最佳组合为Ａ　Ｂ　ｃ　。即，极差最大的是料　

液比ｃ，以第２水平料液比１：１５咖Ｌ为优；其次是浸　

提温度，第１水平和第３水平差异较小，即浸提温度　

６０℃和浸提温度８０℃所得茶多酚含量差异不大，但　

第１水平温度较低，所以浸提温度以６０℃为优；极差　

最小的是乙醇体积分数，以６０％为优。　

虽然适当提高浸提温度，加大料液比可以提高黄酮的　

提取量，但从节能及节约的角度看，金银花中黄酮提　

取的最佳浸提条件为：浸提温度６０℃，乙醇体积分数　

６０％，料液比１：１５　ｍＬ，浸提时间４　ｈ，。利用试验所　

得黄酮提取的最佳工艺对金银花中的黄酮含量进行　

测定，其提取率达到１０．４９％。　

３结论　一一靴一本研究通过乙醇回流提取金银花中黄酮类化合　

物，通过单因素试验研究了乙醇体积分数、一一一一一一一一一　浸提温度、　

浸提时间和料液比对黄酮浸提量的影响，并采用正交　

试验得到提取黄酮的最佳工艺，即金银花中黄酮类化　

合物的最优浸提条件是６０％的乙醇，料液比１：１５咖Ｌ，　

提取时间４　ｈ，浸提温度６０℃，浸提１次时黄酮提取量　

可达到１０．４９％。　

参考文献：　

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京：科学出版社，１９７５：２９６　

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［４］丁利君，吴振辉，蔡创海，等．金银花中黄酮类物质最佳提取工艺　

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收稿日期：２０１２—１０—１０