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分泌物检查详解

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2022年4月17日发(作者:青浦中山医院)

分泌物检查

拼音yīndàofēnmìwùjiǎnchá

英文参考examinatiampleofvaginaldischarge

分泌物标本的采集

分泌物(vaginaldischarge)为女性生殖性系统分泌的液体,俗称

“白带”。主要来自宫颈腺体、前庭大腺,此外还有子宫内膜、

粘膜的分泌物等。

标本采集前24小时,禁止,盆浴、检查、灌洗及

局部是药等,以名胜影响检查结果。取材所用消毒的刮板,吸管或棉

拭子必须清洁干燥,不粘有任何化学药品或润滑剂。窥器插入前

必要时可用少许生理盐水湿润。根据不同的检查目的可自不同部位取

材。一般采用盐水浸湿的棉拭子睚深部或穹后部、宫颈管口

等处取材,制备成生理盐水涂片以观察分泌物。生理盐水悬滴可

检查滴虫,涂制成薄片以95%乙醇固定,经过巴氏染,吉姆萨染

升革兰氏染,进行肿瘤细胞筛查或病原微生物检查。

分泌物外观及清洁度检查

在生量状态下,女性生殖系统由于的组织解剖学和生物化学特点

足以防御外界病原微生物的侵袭。从新生儿到青老大爷期,双侧大小

合拢严紧,外女膜完整,前后壁贴接,使管腔闭合,以青春

期后,由于雌激素的影响,上的上皮由单层变为复层。上皮细胞

内底层外,均含有不同量的糖原,同时受卵巢功能的影响,有周期的

变化及脱落,脱落后细胞破坏放出糖原,借杆菌作用,将糖原转

化为酸,使PH保持在4-4.5之间,只有杆菌能在此环境

中生存。因此在正常健康妇女,本身有自净作用,形成自然防御

功能。

分泌物一般性状检查

检查正常分泌物为白稀糊状,一般无气味,量多少不特恙雌激

素水平高低及生殖器官充血情况有关,于近排卵期白带量多,清澈透

明、稀薄似鸡旦清,排卵期2-3天后白带混浊粘稠、量少、行经前量

又增加。妊娠期白带量较多。

白带异常可表现为、质、量的改变:

1.大量无包透明粘白带常见于应用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤

时。

2.脓性白带:黄或纲绿有臭味,多为滴虫或化脓性细菌性感染

引起的;泡沫疚状脓性白带,常见于滴虫性炎;其它脓性白带见

于慢性宫颈炎、老年性炎、子宫内膜炎、宫腔积脓、异物等。

3.豆腐渣样白带:呈豆腐查样或凝状小碎块,为念珠菌炎所

特有,常伴有外阴瘙痒。

4.血性白带:内混有血液,血量多少不定,有特殊臭味。对这类白

带应警惕恶性肿瘤的可能,如宫颈癌、宫体癌等,有时某些宫颈息肉、

子宫粘膜下肌瘤、老年性炎、重度慢性宫颈炎和宫内节育器引起

的副反应也可在白带中见到血液。

5.黄水样白带:由于病变组织的变性、环死所致。常发生于子宫

粘膜下肌瘤,宫颈癌、子宫体癌、输卵管癌等。

分泌物清洁度检查

将分泌物加生理盐水作涂片,用高倍镜检查,主要依靠白细胞、

上皮细胞、杆菌与杂菌的多少划分清洁度,见表12-1。

表12-1分泌物清洁度分级

清洁度

所见成分

临床意义

Ⅰ度

大量杆菌和上皮细胞,白细胞0-5/HPF,杂菌无或极少

正常

Ⅱ度

中等量杆菌和上皮细胞,白细胞10-15/HPF,杂菌少量

亦属正常

Ⅲ度

少量杆菌和上皮细胞,白细胞15-50/HPF,杂菌较多

提示有炎症

Ⅳ度

无杆菌有少量上皮细胞,白细胞>30/HPF,大量杂菌

多见于严重的炎

卵巢功能不足、雌激素减低,上皮增生较差时可见到杆菌减

少,易感染杂菌。单纯清洁度不好而未发现病原微生物,为非特异性

了道炎。当清洁度为Ⅲ~Ⅳ度时常可同时发现病原微生物,提示存在

感染引起的炎。

分泌物微生物检查

(一)原虫

引起感染的原虫主要有是毛滴虫,可致滴虫性炎。病人

外阴灼热痛、瘙痒,分泌物呈稀脓性或泡沫状,将此分泌物采用

生理盐水悬滴法置于低倍显微镜下观察,可见波动状或螺旋状运动的

虫体将周围白细胞或上皮细胞推动。在高倍镜下可见虫体为8-45μ

m,呈项宽尾尖倒置梨形,大小多为白细胞的2-3倍,虫体项端有前

鞭毛4根,后端有后鞭毛一根,体侧有汉动膜,借以移动。此时

分泌物的清洁度为Ⅲ、Ⅳ度。

貌岸然毛滴虫生长繁殖的适宜温度为25-42摄氏度,故在检验时

应注意保温,方可观察到毛滴虫的活动。分泌物中查到

分泌物滴虫是诊断滴虫性炎的依据,近年来采用毛滴虫单抗

制的胶免疫凝聚法剂盒可提高滴虫性炎的诊断率。

在分泌物中见到溶组织阿米巴滋养体时,提示为阿米巴性

炎。

(二)真菌

真菌有时在中存夺而无害,在抵抗力减低时容易发病,

真菌性炎发找到真菌为诊断依据,真菌多为白假丝酵母

菌,偶见纤毛菌、放线菌等。采用悬滴法于低倍镜下可见到白

丝假酵母菌的卵圆形孢子和假菌丝。如取分泌物涂片并时行革兰

氏染后油观察,可见到卵圆形革兰氏阳性孢子或与出芽细胞相连接

的假菌丝,成链状及分支状。

(三)淋病奈瑟菌

淋病是目前世界上发病率较高的性传播疾病之一。国内统计约占门诊

性病患者的40%。人类是淋病奈瑟菌唯一的宿主。在性关系紊乱情况

下造成在人中的广泛传染及流行。临床上多娄箐南现急性症状,少

数为慢性过程。淋病奈瑟菌的检查首先采用涂片法,发宫颈管内分泌

物涂片的阳性率最高,为100%;上1/3部分为84%;口处

为35%。一般需将宫颈表面脓液试去,用棉拭子插入宫颈管1厘米深

处停留10-30s,旋转一周取出,将分泌生在玻片上,革兰氏染后

油镜检查,找革兰氏性双球菌,形似肾或咖啡豆状,凹面相对,

除散在于白细胞之间外,还可见其被吞噬于中性粒细胞胞质之内,因

淋病奈瑟菌对各种理化因子抵抗力弱,涂片法可被漏诊,必要时可进

行淋病奈瑟菌培养,且有利于菌株分型和药过敏试验。近年来采用单

克隆抗体技术生产的淋病抗血清,可与受检查者宫颈分泌物中的淋病

奈瑟菌结合,采用免疫荧光技术,在30分钟内即可准确得出结果。

比培养法快,比涂片支准确,较易掌握。此外运用PCR技术也可对

淋病奈瑟菌过少,杂菌过多的标本进行诊断。

对于淋病非显性感染者,其淋病奈瑟菌的镜检出和培养检查常为阴

性,但却是淋病的重要传染源。为此,近年来制备了多种检测淋病奈

瑟菌的基因探针。大部分淋病奈瑟菌内含有多拷贝的4。2kb隐蔽性

质粒,此外淋病奈瑟菌青毒素抗性主要是由编码β-骨酰胺酶的质粒

决定的,用这两种质粒标记的探针与分泌物进行斑点杂交可分别

探测淋病奈瑟菌及其抗药性。其特异性敏感性均很高。目前还制备出

淋病奈瑟菌DNA探针、菌毛探针和RNA探针,也建立了各种特异

性高,敏感性强、简便快速的右面放射性标记的检测系统,成为淋病

奈瑟菌及其抗药性检查的重要方法。

(四)加德钠菌

加德钠菌(Gardherellavaginalis;GV)和某些厌氧菌共同引起的细

菌性病亦属于性传播疾病之一。该菌还能以非性行为方式传播。

除引起病外,尚可引起早产、产褥热、新生儿败血症、绒毛膜羊

膜炎、不后败血症和脓毒血症等。加德钠菌产生高浓度的丙酮酸

的氨基酸,可被厌氧菌脱羧基生成相应的胺,引起皮肤粘膜过

敏。血管通透性增加,上皮细胞脱落,分泌物呈奶油状大量排出,

有恶臭。患者分泌物革兰氏染后可见性或染不定有时可

染成革兰氏阳性的小杆菌。大小为(1.5-2.5)μm×0.5μm,具有多形

性,呈杆状或球杆状,分泌物PH常大小4.5,胺试验阳性。

除对加德钠菌形态学鉴别外,还可进行菌检查,由于细菌

性貌岸然病时酸杆菌减少,加德钠氏菌的厌氧菌增加,可计算

酸杆菌和加德钠菌的数量变化,作为本病诊断参考。一般取分

泌物涂片,革兰氏染,用油镜观察3-5个视野,计算各种菌的数量。

酸性杆菌为革兰氏阳性大杆菌,(1-5)μm×1μm,常成双,单根、

链状或栅状排列,非细菌性病酸杆菌>5个/油视野仅见少许

加德钠菌。细菌性病不仅可见到加德钠菌,还有其它革兰氏阴性

或阳性杆菌,无酸杆菌或小于5个/油镜视野。

寻找分泌物中的线索细胞,是诊断加德钠菌性貌岸然病的重

要指标。线索细胞为鳞状上皮细胞粘附多数加德钠菌所致生理盐

水涂片可见该细胞边缘呈现锯齿状。细胞已有溶解,核模糊不清,其

上附着大量加德钠菌及厌氧菌,使其表面毛糙,有斑点和大量的细小

颗粒,亦右用吖啶橙染法或相差显微镜观察法检查线索细胞。此外

还可用培养、荧光板、气-液谱分析和PCR方法等助诊。

(五)衣原体

泌尿生殖道沙眼衣原体感染是目前很常见的性传播疾病之一,国外报

道生殖道感染率为10。8%,由于感染后无特异症状,易造成该病流

行,引起子性急性炎和宫颈炎。及原体感染的白带脓性粘液,与

细菌感染的脓性白带不同。取脓性分泌物涂片,吉姆萨染,有进时

可见到细胞内包涵体,但阳性率很低。过去采用传统的组织培养分离

衣原体的方法,技术难度大,特异性敏感性均不理想,且费时费钱。

目前应用较多的是荧光标记的单克隆抗体的直接荧光抗体法,可快速

确定系何种血清型衣原体敏感。80年代发民展的DNA探针技术,可

将分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/

氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针,如外膜蛋白基因的高度保守序

列,或TE-55DNA探针等进行斑点杂交,可检出沙眼衣原体的15个

血清型,而与其它细菌,病毒、立克次体等无交叉反应,敏感性和特

异性均为95%左右。DNA探针方法对泌尿生殖道衣原体疾病的诊断、

流行病学调查和无症状衣原体携带者的诊断很有意义。

(六)病毒

在人类性传播疾病中有相当一部分是由病毒引起的。可从分泌物

中检测的病毒有:

单纯疱疹病毒(herpessimplexvirus,HSV)

有二个血清型,HSV-I和HSV-Ⅱ型。引起的生殖道感染的以Ⅱ型为

主,约占85%。表南为生殖器官疱疹,溃疡并通过胎盘引起胎儿感染,

发生死胎、流主和畸形。实验诊断多取病损处分泌物涂片进生细胞学

检测、病毒培养或荧光抗体检测。在孕期感染的监测中,可采取宫颈

部位分泌物做包涵体检查。单纯疱疹病毒以侵犯军团颈鳞状上皮多

见。感染早期细胞轻度或中度增大,核呈嗜碱性不透明的匀质状毛玻

璃样外观,偶伴有核空泡化。由于核的增殖与胞质肿大而形成多核或

巨大细胞。感染晚期可发现细胞核内有嗜伊红包涵体,周围有透明晕,

由于分泌物检查阳性率低,病毒培养操作复杂费时,近年来对

HSV的检查主要采用荧光抗体检查或分子生物方法诊断,特别是利

用HSV基因组异性强的DNA片段棗HSV-I和HSV-Ⅱ,胸腺激

酶的寡核苷酸探针和RNA探针进行分子杂交,可快速而灵敏地对

HSV感染作出诊断。

人巨细胞病毒(humancytmegalovirus,HCMV)

是先天感染的主要病原。一次感染后终年潜伏于体内,在机体免疫力

低下时病毒激活,可表现为巨细胞包涵体病。孕期胎儿中枢神经系统

受到侵犯可致小头畸形、智力低下、视听障碍等后遗症。故孕妇

分泌物巨细胞病毒检查对孕期监测尤其是重要的,常用宫颈拭子采取

分泌物送检。HCMV实验室诊断方法除传播病毒离法外,光镜检测

包涵体阳性就绪极低,电镜可直直接见到典型的疱疹病毒类形态结

构,但无特异性,目前可采用CC-ABC法,即将标本接种于人胚肺

成纤维细胞培养细胞,使病毒在敏感细胞中增殖,培养2天后收获,

再用针对HCMV早期抗原的单克隆抗体,利用生物素亲和素放大作

用染鉴定。亦可用HCMV、DNA片段或RNA探针与样品进行斑

点杂交,夹心杂交或PCR后勤部的分子杂交来检测,临床最常用的

方法是用ELISA法检测孕妇血清HCMV-IGM来诊断活动性感染。

人头状病毒(humanpapillomavirus,HPV)

HPV目前鉴别有50余型。引起妇性生殖道感染的有23型,其中最

主要的有6,11,16,18,31,33,型。HPV感染细胞后细胞的作用

的主要表现为:①增殖感染,即病毒在宿主细胞内复制,产生感染子

代致使细胞死亡。②细胞转化,引起肿瘤发生,主要是引起生殖道鳞

状上皮肉瘤样变,如16,18,31,33,35,29,型,尤其是宫颈癌

患者以检查出16,18型为多见。HPV检测亦可采用传统的病毒培养、

分泌物涂片、光镜检测。HE染可见核周空晕。“气球样”病毒感染

空泡细胞,但阳性率很低。下生殖道疣状赘生物者常可进行病理学镜

可电镜检查,可峥到典型的病毒感染细胞或闰毒颗粒。目前常采用

ABC法以兔抗HPV为一抗,生物素标记的羊抗兔IGG为二抗检测病

毒抗原。或采用病毒相应的寡核苷酸探针,与分泌物中提取的

DNA进行斑点杂交或夹心杂交进行检测。如采用PCR技术则可检测

极微量的HPV(即106个细胞中有一个感染细胞)

分泌物检查临床操作

适应证

1.分泌物检查主要用于常见炎的鉴别诊断,常见的炎有

滴虫炎、外阴念珠菌病及细菌性病。主要有悬滴法、pH

测定和培养法。悬滴法及培养法用于检测三种常见炎的病原体;

pH测定是根据三者的病原体不同、分泌物的pH不同,来检测

分泌物的pH值。

2.培养法主要用于:①临床高度怀疑滴虫炎或外阴念珠菌

病,但悬滴法检测滴虫或念珠菌阴性;②临床已诊断滴虫炎或外

阴念珠菌病,但经过抗滴虫治疗或抗真菌治疗,疗效不佳,考虑

有耐药发生。此外,复发性外阴念珠菌病考虑有非白念珠菌感染

的可能时,均应做分泌物培养,确定病原体。

禁忌证

出血期间禁作此项检查。

准备

1.生理盐水或10%氢氧化钾。

2.玻片、刮板。

3.备窥器、无菌手套。

方法

1.悬滴法

(1)方法:悬滴法也称湿片法,有生理盐水悬滴法及10%氢氧化钾

悬滴法。前者用于检测滴虫及线索细胞,后者用于检测念珠菌的芽胞

及假菌丝。将1~2滴生理盐水及10%氢氧化钾分别放在两张玻片上,

取上1/3处的分泌物(或内典型分泌物)分别与玻片上的生

理盐水或10%氢氧化钾混合,然后在显微镜下进行检查。

(2)诊断标准:在生理盐水的湿片上见到呈波状运动的滴虫及增多

的白细胞,即可诊断滴虫炎。在10%氢氧化钾的湿片上见到芽胞

及假菌丝可诊断为外阴念珠菌病。在生理盐水的湿片上见到线索

细胞,结合分泌物的其他特点,如白、均质的分泌物,胺试验阳性,

pH>4.5,则可诊断细菌性病。

测定

(1)方法:pH测定主要采用精密pH试纸(4~7)测定分泌

物的pH值。

(2)诊断标准:滴虫炎的分泌物pH>4.5。外阴念珠

菌病的pH<4.5,若pH>4.5,提示有混合感染,如同时有滴虫感染

等。细菌性病应pH>4.5。

3.培养法

(1)滴虫培养:取分泌物放在肝浸汤培养基或大豆蛋白胨培养

基中,37℃孵育48h后镜检有无滴虫生长。

(2)念珠菌培养:取分泌物放在TTC沙保罗(Sabouraud)培

养基上,置湿温或37℃温箱,3~4d后出现菌落。若菌落为白,

有可能为白念珠菌,若为红、紫红等其他颜可能为非白念珠菌。

若进一步对白念珠菌及非白念珠菌进行菌种鉴定,需在玉米-吐温培

养基上进一步培养,25℃培养72h,显微镜下有假菌丝,中隔部伴有

成簇的圆形分生孢子,顶端有厚壁的后膜孢子,芽管试验阳性,即为

白念珠菌。不符合以上特征的即为非白念珠菌。其他非白念珠菌的菌

株鉴定,须通过糖发酵及糖同化试验进一步鉴定。

无症状时不应做培养。

注意事项

做悬滴法检查时,注意取分泌物前24~48h避免、灌洗或局

部用药,取分泌物时窥器不涂润滑剂,分泌物取出后应及时送检,若

怀疑滴虫,应注意保暖,尤其冬日,否则滴虫活动力减弱,造成辨认

困难。

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