医学信息　

・２５０６・　Ｎｏ．９　２０１０　

药物与临床　

诺氟沙星组治愈率为７３．３％，而热淋清颗粒与诺氟沙星合用治疗组治愈率　

为９３．３％，总有效率为９５％。此外，本组的结果还显示，使用热淋清颗粒可　

明显缩短尿路感染症状及体征的消失时间，并能提高细菌清除率；其与诺氟　

沙星联合应用产生协同作用，可作为治疗尿路感染的一种有效药物。同时，　

使用热淋清颗粒治疗尿路感染，可以避免因长期、大量使用抗生索而导致的　

耐药菌增加、菌失调和损害肝肾功能等缺点，在临床使用中，未发现明显　

的毒副作用。　

热淋清颗粒是一种纯中药制剂，为棕至深褐颗粒，气味芳香，口服　

大肠杆菌ｌ２例，变形杆菌１例，）治疗后１２例细菌被清除，细菌清除率为　

９２．３（１２／１３）。　

两组细菌清除率的差别经ｆｉｓｈｅｒ直接概率法检验，Ｐ＜０．０５，认为热淋清　

颗粒加诺氟沙星组细菌清除率优于单用诺氟沙星组。　

２．４不良反应的比较。诺氟沙星组中，不良反应发生率为１３．３％（２／　

ｌ５），表现为恶心１例，呕吐１例；热淋清颗粒加诺氟沙星组中，不良反应发　

生率为６．９％（１／１５），表现为胃部不适。治疗前后两组病人均未见周围血中　

自细胞计数明显下降及肝肾功能的损害。两组不良反应率的差别经ｆｉｓｈｅｒ　

直接概率法检验差异为显著性（Ｐ＞０．０５）。　剂型，临床使用方便，患者依从性较好，值得推广使用。另外，热林清颗粒为　

３．讨论　无糖型，对糖尿病患者，尤为适用。　

热淋清颗粒是根据贵州民间流传的苗药验方，精选贵州传统药材蓼科　

植物头花蓼（头花蓼又称石莽草，为我国西南地区特有的药用植物，主要产　

参考文献　

于贵州省）为主要原料，采用现代提取工艺，提取精制而成的口服颗粒剂。　

［１］吴阶平．泌尿外科．济南：山东科学技术出版社，１９９３：６２—６９．　

具有清热解毒、抗菌消炎、利尿通淋、活血消肿之功效，常用于急慢性肾盂肾　

［２］　冯永山，白兆震．热淋清颗粒治疗非琳球菌性尿道炎的疗效观察．临床　

炎、膀胱炎、尿道炎、尿路结石、前列腺炎、炎、盆腔炎、宫颈炎、淋病及性　

泌尿外科杂志，２ｏｏｌ，１６（１２）：５４３．　

病后遗症等治疗。药理实验对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾　

［３］　吴勇，潘正跃，等．热淋清颗粒治疗尿路感染的临床研究观察．『｝缶床泌　

杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、淋球菌等革兰氏阳性、阴性菌有优良的抗菌作　

尿外科杂志，１６０６—８１０６（２ｏｏ３）ｌ２—１７９７一Ｏ２．　

用。本组观察发现该药在临床治疗尿路感染中有显著辅助疗效作用。单用　

消癌平注射液体外作用于ＨＥＬ细胞株的实验研究　

方奕奇　

南京中医药大学，江苏南京２１００４６　

【摘要】目的：探讨消癌平注射液对白血病细胞的抑制和凋亡作用。方法：以消癌平注射液处理ＪＡＫ２突变的人红白血病ＨＥＬ株，Ｍ１Ｔｒ法检测其对细胞　

的抑制作用，Ａｍｅｘｉｎ　Ｖ／ＰＩ双染法检测细胞的凋亡程度。结果：高浓度的消癌平注射液（６０ｕ￣ｍｌ，７０ｕ￣ｍｌ，８０ｕｌ／ｍｌ，９０ｕ￣ｍ１），时ＨＥＬ细胞均有抑制作用，且　

呈剂量依赖。经统计学分析有差异。消癌平注射液达到一定浓度时（５０ｕ￣ｍｌ，７５ｕ￣ｍ１），未显示诱导细胞凋亡的作用，更高浓度（１ｏｏｕＩ／ｍＩ）导致细胞直接死　

亡。结论：高浓度的消癌平注射液对人红白血病ＨＥＬ细胞有抑制作用，且呈量效关系。消癌平注射液对诱导ＨＥＬ细胞凋亡无明显影响。　

【关键词】通关藤；细胞凋亡；抗肿瘤；流式细胞术；ＪＡＫ２　

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６—１９５９．２０１０．０９．２５２　文章编号：１００６—１９５９（２０１０）一０９—２５ｏ６一Ｏ２　

Ｂｅｔ—ａｂｌ阴性的骨髓增殖性肿瘤（ＭＰＮ）一直是临床治疗的难点，２ｏｏ５　

１．２．３　Ａｎｎｅｘｉｎ　Ｖ／ＰＩ双染法检测细胞凋亡：取对数生长期细胞，以每孔　

年ＪＡｌ（２　Ｖ６１７Ｆ点突变的发现使得人们对ｂｃｒ—ａｂｌ阴性的ＭＰＮ的发病机制　

１×１０　个／ｍｌ细胞接种于培养瓶。实验组加消癌平注射液的培养液，使其最　

有了新的认识，分子机制的明确促进了ＭＰＮ分子靶向抑制治疗的研究进　

终浓度分别为２５ｕ￣ｍＬ，５０ｕ￣ｍＬ，７５ｕ￣ｍＬ，ｌ００ｕＬ／ｍＬ。培养２４ｈ。离心，去　

程，多种ＪＡｌ（２抑制剂正在进行临床前研究，有些已经进入ｆＩ缶床验证阶段，初　

上清，用ＰＢＳ洗涤细胞两次。用４００ｕｌ　１Ｘ　Ｂｉｎｄｉｎｇ　Ｂｕｒｒ悬浮细胞，浓度大约　

步结果显示体内外均有抑制ＪＡＫ２相关的信号途径的作用。但其研发成本　

为１×１０　个／　。在细胞悬浮液中加入５ｕｌ　Ａｎｎｅ￣ｎ　Ｖ　ＦＩ１、Ｃ，轻轻混匀后于２　

及治疗费用均偏高，且其可预测副作用较大。因此，有必要寻求疗效好、毒　—８℃避光条件下孵育１５分钟。加入１０ｕｌ　ＰＩ后轻轻混匀于２—８℃避光条件　

副作用小的新的治疗方法和药物。而运用中药治疗恶性肿瘤，越来越被广　下孵育５分钟。在１小时内用流式细胞仪检测。　

大学者和患者接受，是恶性肿瘤综合治疗中的有效手段之一。　

１．２．４统计学分析：应用统计软件ｓＰｓｓ１１．０进行统计学处理，统计方　

通关藤，又称通光藤、乌骨藤，系萝摩科牛奶菜属植物通光散的藤茎，始　

法采用ｔ检验和ｘ　检验。　

载于‘滇南本草）¨３，分布于云南和贵州，性味苦，微甘、凉，人肺胃膀胱经，　以ａ＝０．０５作为检验水准。　

具有抗癌、免疫调节、降压、戒毒作用及保肝利尿、恢复肿瘤患者放疗、化疗　２．结果　

后白细胞下降等作用。“消癌平”为其成药商品名。本实验通过体外抗肿瘤　２．１　对ＨＥＩ　细胞的抑制作用。不同浓度的消癌平注射液作用于体外　

实验方法观察了通关藤制剂一消癌平注射液，体外抗ＪＡｌ（２突变的人红白血　培养的ＨＥＬ细胞２４ｈ后，用ＭＴｒ法测定其对细胞增殖的抑制作用。ＭＴＴ结　

病ＨＥＬ细胞株活性，并应用细胞生物学及分子生物学技术探讨了消癌平注　果显示消癌平注射液对ＨＥＬ细胞具有显著的抑制作用，实验组与对照组比　

射液体外抗肿瘤作用的可能机制。　

较，高浓度组（６０ｕ￣ｍｌ，７０ｕｌ／ｍ１，８０ｕ￣ｍｌ，９Ｏｕ　Ｈｄ）ＯＤ值差异有统计学意义　

１．材料与方法　

（Ｐ＜０．０１）。当浓度为６ｏｕＬ／ｍＬ，７０ｕ￣ｍＬ，８０ｕ￣ｍＬ，９０ｕ￣ｍＬ时，其抑制率　

１．１材料：人红白血病ＨＥＬ细胞，购自中国科学院细胞库。（经Ｒｅａｌ—　

随浓度的降低有所下降，在一定范围内呈浓度依赖性。　

ｔｉｍｅ　ＰｃＲ检测，本细胞含有ＪＡ￣Ｖ６１７Ｆ纯合突变）。消癌平注射液（２ＯｍＬ／　２．２流式细胞仪检测细胞凋亡。不同浓度消癌平注射液对ＨＥＬ细胞　

支）：由南京圣和药业有限公司提供。四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）：上海生工生　

处理后。第２４ｈ可见浓度在２５ｕＬ／ｍｌ时凋亡率低于对照组，浓度在５０ｕＬ／ｍｌ　

物工程有限公司。胎牛血清：ＣＩＢＣＯ公司。ＲＰＭＩ一１６４Ｏ粉：ＧＩＢＣＯ公司。　以上时细胞凋率可超过对照组，１ｏ０ｕＬ／Ⅱｄ细胞９５．５％死亡。第４８ｈ可见浓　

凋亡检测试剂盒：ＢＥＳＴＢＩＯ公司。　

度在２５ｕ￣ｍｌ时凋亡率仍低于对照组，浓度在５ＯｕＬ／ＩＴｌｌ时细胞凋率可超过对　

１．２方法：　

照组，７５ｕ￣ｍｌ以上细胞大部分死亡。第４８ｈ可见浓度在２５ｕＬ／　时凋亡率　

１．２．１细胞培养：ＨＥＬ细胞悬浮生长于含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ一　

仍低于对照组，且与浓度在５ＯｕＬ／ｍ１时细胞凋率无明显差异，７５ｕＬ／　以上　

１６４０培养基中，在３７℃，体积分数为５％的ＣＯ２饱和湿度下培养。取状态良　细胞大部分死。　

好、处于对数生长期ＨＥＬ细胞进行实验。　

３．讨论　

１．２．２　Ｎ＇ＩＴ比法检测细胞增殖：取待检细胞与培养液配成悬液，以　

本实验结果表明，消癌平注射液不同剂量组作用于ＨＥＬ细胞２４ｈ于阴　

每孔１　ｘ　１０　个细胞接种于９６孔培养板中。实验组加消癌平注射液的培养　性对照组比较。只用在较高浓度下（５０ｕ￣ｍＬ，６ｏｕＩ／ｍＬ，７０ｕ￣ｍＬ，８０ｕ￣ｍＬ，　

液，使其最终浓度分别为ｌＯｕ￣ｍＬ，２０ｕ￣ｍＬ，３０ｕ￣ｍＬ，４ｏｕＬ／ｍＬ，５０ｕ￣ｍＬ，　

９０ｕ￣ｍＬ）有统计学意义（Ｐ＜０．Ｏ１），表明通关藤注射液在浓度５０ｕ￣ｍＬ以　

６０ｕＬ／ｍＬ，７０ｕ￣ｍＬ，８０ｕ￣ｍＬ，９０ｕ￣ｍＬ，同时设不加药阴性对照和本底对照　上可以显著抑制ＨＥＬ细胞的增殖。且随着药物浓度的升高，抑制率升高。　

孔（不含细胞的等体积含相应浓度药物培养液），每组设５个复孔，每孔　

本研究用流式细胞仪检测了不同浓度消癌平注射液对ＨＥＬ细胞处理２４ｈ、　

２ｏｏｕＬ。每　Ｌ加入ＭＴｒ溶液（５ｍｇ／ｍＬ）２ＯｕＬ　３７℃继续孵育４ｈ，离心，去上清。　

４８ｈ、７２ｈ后细胞凋亡情况，数据表明药物达到一定浓度时仍无法显著促进细　

每孔加入１５０ｕＬ　ＤＭＳＯ，振荡溶解３ＯｆＩｌｉｎ。用自动酶标仪测定４９Ｏｈｍ波长下　

胞加速凋亡，且继续提高浓度只能促进细胞直接坏死。实验结果提示注射　

的吸光度（Ａ），计算细胞增殖抑制率　Ｊ。　

液对人红白血病ＨＥＬ细胞的调亡无明显影响，其抑制细胞生长的机制可能　

细胞生长抑制率：（对照组ＯＤ均值一实验组ＯＤ均值）／对照组ＯＤ均　

并不是通过诱导凋亡来实现的。　

值×１００％。　

虽然多有文献报导“消癌平”有诱导细胞凋亡的作用，但研究表明其对